發(fā)布時間：2017-09-20 05:39

  本文關(guān)鍵詞：類鼻疽伯克霍爾德氏菌感染RAW264.7細胞模型的建立

  更多相關(guān)文章： 類鼻疽伯克霍爾德氏菌 小鼠巨噬細胞(RAW.) 細胞模型

【摘要】：目的建立類鼻疽伯克霍爾德氏菌感染小鼠巨噬細胞RAW264.7的細胞模型,為進一步研究其致病機制奠定基礎(chǔ)。方法摸索類鼻疽伯克霍爾德氏菌培養(yǎng)條件、構(gòu)建模型的感染條件(e.g.感染復數(shù),感染時間),通過吉姆薩染色、透射電鏡、活細胞工作站動態(tài)觀察等確證胞內(nèi)感染和宿主細胞的形態(tài)變化,分析病原菌侵襲率、胞內(nèi)復制率和宿主反應性來評價該模型中病原菌侵入RAW264.7特點和病理損傷類型。結(jié)果確定了類鼻疽伯克霍爾德氏菌的一般培養(yǎng)條件,感染復數(shù)MOI=100感染宿主細胞,170g離心5min后37℃共孵1h以利于細菌侵入胞內(nèi),含250μg/ml卡那霉素的DMEM-10培養(yǎng)以殺死胞外病原菌。形態(tài)觀察,類鼻疽伯克霍爾德氏菌感染后最早8h可觀察到異物多核巨細胞(MNGC),RAW264.7細胞伸出偽足,相互融合。感染初期(3h)TNF-α升高較快,9h后則下降至低值,直至感染后期(15～24h)再次升高。結(jié)論成功構(gòu)建類鼻疽伯克霍爾德氏菌胞內(nèi)感染模型,擬為進一步研究其致病機制提供了條件。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學醫(yī)學檢驗系臨床微生物教研室;第三軍醫(yī)大學醫(yī)學檢驗系臨床血液教研室;
【關(guān)鍵詞】： 類鼻疽伯克霍爾德氏菌 小鼠巨噬細胞(RAW.) 細胞模型
【分類號】：S852.61;R378
【正文快照】： 類鼻疽伯克霍爾德氏菌(Burkholderia pseud-omallei)又稱類鼻疽桿菌,屬于假單胞菌屬,2006年被美國CDC列為B類生物恐怖劑。它能感染機體幾乎任何器官,導致的疾病稱類鼻疽,是一種典型的熱帶疾病,有很高的誤診和死亡率,是一種正在擴散的人獸共患病[1-2]。急性感染主要表現(xiàn)為急性

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