本文關(guān)鍵詞：代謝綜合征藥物高通量篩選模型的建立

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【摘要】：線粒體對于真核細胞至關(guān)重要,除了為細胞提供能量,還參與細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、分化與生長、凋亡等生命過程.許多疾病的發(fā)生與線粒體功能失常密切相關(guān),包括神經(jīng)退行性疾病、糖尿病、肥胖、腫瘤等.由于線粒體膜電位是反映細胞功能狀態(tài)的重要指針,因此選用了代謝性細胞L6大鼠肌管細胞建立了一種快速且高效地分析線粒體膜電位的高通量篩選模型.通過對線粒體染料JC-1濃度及孵育時間、待篩選化合物孵育時間、陽性化合物CCCP(carbonylcyanide-m-chlorophenylhydrazone)濃度等實驗條件的優(yōu)化,確立了篩選條件,并對魚藤酮、丙二酸、抗霉素A、寡霉素和黃連素(berberine)等線粒體抑制劑進行驗證,證實該篩選體系的可靠性.以10μmol L?1CCCP作為陽性對照,篩選體系的整體CV值(變異系數(shù))為5.92%,Z′因子為0.575,符合高通量篩選的要求.L6肌管細胞線粒體膜電位高通量篩選模型的建立,將為發(fā)現(xiàn)治療代謝綜合征的新藥先導(dǎo)化合物提供更多機會.
【作者單位】： 華東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;中國科學(xué)院上海藥物研究所 新藥研究國家重點實驗室 國家新藥篩選中心;
【關(guān)鍵詞】： L肌管細胞 線粒體膜電位 高通量篩選 代謝綜合征
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81001463) 中國科學(xué)院創(chuàng)新藥物研發(fā)網(wǎng)絡(luò)(KSCX2-EW-R-15) 上海市科委公共服務(wù)平臺項目(11DZ2292200)資助
【分類號】：R-332
【正文快照】： 線粒體是真核細胞最重要的細胞器之一,是儲存和提供能量的場所、細胞生命活動所需能量的80%由線粒體供給.由于線粒體與許多疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),包括糖尿病、癌癥、神經(jīng)退行性疾病等[1,2],因此線粒體已日益成為研究熱點[3].線粒體膜電位為維持線粒體功能和細胞存活所必需,

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本文編號：840286