本文關(guān)鍵詞：Noxa基因的克隆及其誘導(dǎo)A549細胞凋亡的研究

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【摘要】：目的克隆人Noxa基因,構(gòu)建真核表達質(zhì)粒pcDNA-Noxa,將重組質(zhì)粒pcDNA-Noxa轉(zhuǎn)染人肺癌A549細胞株,并觀察重組質(zhì)粒pcDNA-Noxa誘導(dǎo)A549細胞凋亡的作用。方法使用RT-PCR的方法擴增出Noxa基因,克隆至真核表達質(zhì)粒pcDNA(-),構(gòu)建出重組質(zhì)粒pcDNA-Noxa。將重組質(zhì)粒pcDNA-Noxa轉(zhuǎn)染人肺癌A549細胞株,使用Western blot的方法檢測Noxa基因的過表達;使用Hoechst 33258染色,觀察A549細胞的凋亡;使用MTT法檢測細胞活力。結(jié)果經(jīng)酶切和測序鑒定,重組質(zhì)粒pcDNA-Noxa構(gòu)建成功。Western blot檢測出Noxa基因的過表達;Hoechst 33258染色和MTT實驗發(fā)現(xiàn):重組質(zhì)粒pcDNA-Noxa能明顯誘導(dǎo)A549細胞出現(xiàn)凋亡現(xiàn)象。結(jié)論本實驗初步探索了Noxa基因的促凋亡作用,為以后進一步深入研究Noxa基因的促凋亡功能基礎(chǔ)。
【作者單位】： 成都醫(yī)學(xué)院;湖北醫(yī)藥學(xué)院
【關(guān)鍵詞】： Noxa 克隆 真核表達 凋亡
【基金】：四川省教育廳面上項目(No.11ZB170) 四川省衛(wèi)生廳科研課題(No.120489) 成都醫(yī)學(xué)院�；�(No.CYZ10-004,No.CYZ11-0059) 成都醫(yī)學(xué)院學(xué)科建設(shè)項目(No.CYXK2012005)資助
【分類號】：R363
【正文快照】： 以手術(shù)、化療和放療為基礎(chǔ)的綜合治療是目前最主要的治療腫瘤的方式。雖然這些傳統(tǒng)的治療方法已經(jīng)取得了很大的進展,但達到的效果有限。目前有些常見的腫瘤如肺癌的5年生存期僅為12%、胃癌約23%、卵巢癌約40%[1],所以人們開始尋求新的治療手段,而選擇性誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡便成

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