本文關(guān)鍵詞：穩(wěn)定表達(dá)Trop-2基因的NIH3T3細(xì)胞系的構(gòu)建和特性分析

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【摘要】：目的:建立穩(wěn)定表達(dá)人滋養(yǎng)層細(xì)胞表面抗原(Trop-2)NIH3T3細(xì)胞,分析過(guò)表達(dá)Trop-2對(duì)NIH3T3細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和侵襲特性的影響。方法:將Trop-2基因克隆到真核表達(dá)載體pcDNA3.1,轉(zhuǎn)染NIH3T3細(xì)胞,通過(guò)G418篩選及RT-PCR鑒定獲得穩(wěn)定表達(dá)Trop-2的NIH3T3細(xì)胞(NIH3T3-Trop-2)。用MTS法檢測(cè)NIH3T3-Trop-2細(xì)胞的增殖能力,軟瓊脂集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)NIH3T3-Trop-2細(xì)胞的克隆形成能力,明膠酶譜法檢測(cè)NIH3T3-Trop-2細(xì)胞的基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的分泌及細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)NIH3T3-Trop-2細(xì)胞的遷移能力。結(jié)果:穩(wěn)定表達(dá)Trop-2的NIH3T3細(xì)胞在生長(zhǎng)增殖、克隆形成及侵襲能力均較NIH3T3細(xì)胞強(qiáng),細(xì)胞培養(yǎng)上清中的MMP-2和MMP-9增多。結(jié)論:Trop-2對(duì)細(xì)胞的增殖與遷移能力具有明顯的促進(jìn)作用。
【作者單位】： 南京軍區(qū)軍事醫(yī)學(xué)研究所;南京醫(yī)科大學(xué)衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;江蘇省血液中心;
【關(guān)鍵詞】： Trop- NIHT 真核表達(dá) 增殖與遷移
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助(81101704) 南京市科技局(201201090)
【分類號(hào)】：R341
【正文快照】： 人滋養(yǎng)層細(xì)胞表面抗原(human trophoblast cellsurface antigen,Trop-2),又稱GA733-1,EP1,M1S1,TACSTD2,是一種細(xì)胞表面糖蛋白。Trop-2在早期胚胎發(fā)育的胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞表面,在正常人體細(xì)胞組織很少表達(dá),但在人滋養(yǎng)層細(xì)胞和上皮細(xì)胞癌組織中(包括乳腺癌、直腸癌、肺癌和前列腺

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