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RhoA蛋白對結核桿菌侵襲A549細胞的影響

發(fā)布時間:2017-09-05 14:08

  本文關鍵詞:RhoA蛋白對結核桿菌侵襲A549細胞的影響


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【摘要】:探討結核桿菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)侵襲A549細胞過程中RhoA蛋白功能。構建靶向RhoA基因的小干擾RNA(siRNA)表達載體si-RhoA,轉染A549細胞,36 h后進行MTB黏附和侵襲細胞實驗,蛋白印跡法(Western blot)檢測RhoA蛋白表達水平,電鏡觀察細胞超微結構改變,激光共聚焦顯微鏡觀察細胞微絲骨架變化并計算F-actin重排指數,定量PCR法測量細胞黏附和內吞的MTB數量。結果顯示,si-RhoA轉染A549細胞后,RhoA蛋白表達下降84.7%,細胞對MTB的黏附能力未改變。MTB侵襲細胞實驗顯示,si-RhoA轉染組細胞F-actin重排指數和內吞細菌數量分別是(63.0±3.1)%和(3.19±0.26)×103拷貝,無關siRNA組分別是(84.5±1.8)%和(4.45±0.29)×103拷貝,前者均少于后者(P0.01)。由此可見,結核桿菌侵襲A549細胞需要RhoA蛋白參與,可能通過"拉鏈"機制介導結核桿菌侵襲非吞噬細胞。
【作者單位】: 湖州師范學院醫(yī)學院創(chuàng)新實驗室;南京軍區(qū)南京總醫(yī)院腫瘤內科;
【關鍵詞】結核桿菌 侵襲 RhoA基因 A細胞
【基金】:國家自然科學基金(批準號:30800988)資助的課題~~
【分類號】:R378
【正文快照】: 結核病由結核桿菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)引起。全球1/3人口受到過結核桿菌感染,約150萬人死于結核病[1]。更為嚴峻的是,臨床上出現(xiàn)的多耐藥(multi-drug resistant,MDR)、泛耐藥(exten-sively drug resistant,XDR)乃至全耐藥(totally drugresistant,TDR)結核桿菌菌

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