本文關(guān)鍵詞：細胞因子誘導外周血單個核細胞的轉(zhuǎn)錄和蛋白表達研究

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【摘要】：采用干擾素-γ、抗CD3單克隆抗體和IL-2體外誘導擴增外周血單個核細胞成為CIK細胞,并于誘導培養(yǎng)前及培養(yǎng)第15 d時分別收集細胞樣本。在對培養(yǎng)前后細胞的增殖、形態(tài)及表面標志變化檢測的同時,提取總蛋白進行定量、雙向電泳和銀染。利用ImageMasterTM軟件對培養(yǎng)前后表達相同和不同的蛋白質(zhì)點進行分析,并選擇其中24個蛋白質(zhì)點進行質(zhì)譜鑒定。對于部分培養(yǎng)前后具有代表性的蛋白,進一步采用qPCR技術(shù)分析其的轉(zhuǎn)錄情況。結(jié)果表明,培養(yǎng)前后細胞的蛋白質(zhì)組學特征是完全不同的,相同表達蛋白點主要與基因的轉(zhuǎn)錄因子和細胞骨架相關(guān),誘導后特異表達蛋白主要與細胞生長、增殖相關(guān)。雖然在轉(zhuǎn)錄與蛋白水平上呈現(xiàn)出部分負相關(guān)現(xiàn)象,由于蛋白質(zhì)組才是基因表達的最終形式,結(jié)合蛋白差異研究結(jié)果提示,經(jīng)細胞因子誘導后,CIK細胞的大量擴增與細胞內(nèi)蛋白表達改變相關(guān)。
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學附屬延安醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： CIK細胞 誘導培養(yǎng) 蛋白質(zhì)譜 qPCR
【基金】：云南省科技廳 昆明醫(yī)學院聯(lián)合基金項目(批準號:2010CD211)資助的課題~~
【分類號】：R363
【正文快照】： 細胞因子誘導殺傷性細胞(cytokine-inducedkiller cells,CIK)是一種新型的廣譜抗腫瘤免疫活性細胞,最早于1986年被人們從外周血單個核細胞在體外用IFN-γ、抗人的CD3+抗體、IL-2等多種細胞因子誘導出來所獲得的一群異質(zhì)細胞,其主要細胞成分為CD3+CD56+細胞和CD3+CD8+細胞,由于

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