日本血吸蟲無機焦磷酸酶的克隆表達(dá)及蛋白特征分析
本文關(guān)鍵詞:日本血吸蟲無機焦磷酸酶的克隆表達(dá)及蛋白特征分析
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【摘要】:目的克隆并原核表達(dá)日本血吸蟲無機焦磷酸酶(SjIPP),分析SjIPP的蛋白特征。方法以日本血吸蟲成蟲cDNA為模板,克隆SjIPP,重組入pET28a質(zhì)粒,并將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入E.coli BL21,用SDS-PAGE和Western blot法鑒定重組蛋白的表達(dá)和特異性,進(jìn)一步分析SjIPP的蛋白特征和同源性。結(jié)果克隆和表達(dá)出的SjIPP均與預(yù)測的分子量大小一致,Western blot法結(jié)果顯示,重組蛋白可被小鼠抗His-tag單克隆抗體特異性識別。生物信息學(xué)分析表明,SjIPP為胞內(nèi)蛋白,含有多個磷酸化位點,B細(xì)胞表位豐富,且與人和小鼠的IPP高度同源。結(jié)論成功克隆表達(dá)出SjIPP,為進(jìn)一步利用SjIPP奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)病原生物學(xué)教研室;徐州紅十字中心血站質(zhì)量管理科;蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗科;
【關(guān)鍵詞】: 日本血吸蟲 無機焦磷酸酶(EC ...) 克隆 蛋白特征
【基金】:安徽省自然科學(xué)基金(編號:1308085MH124) 安徽省教育廳自然科學(xué)研究重點項目(編號:KJ2011A205)
【分類號】:R383.24
【正文快照】: 血吸蟲病是危害人類健康的重要的寄生蟲病[1-2],我國是日本血吸蟲病主要流行區(qū),據(jù)推算目前我國現(xiàn)癥患者約28.7萬人[3]。盡管由于低毒高效的吡喹酮藥物治療,血吸蟲病患者的死亡率明顯下降,但是不能預(yù)防血吸蟲的感染與再感染,再者由于大規(guī)模水利設(shè)施的興建[4-5],血吸蟲病的控制
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