發(fā)布時(shí)間：2017-08-25 16:11

  本文關(guān)鍵詞：Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎腸神經(jīng)系統(tǒng)中的表達(dá)及意義

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【摘要】：研究背景及研究目的：腸道神經(jīng)系統(tǒng)(Enteric Nervous System, ENS)相關(guān)的一系列疾病一直以來(lái)都是醫(yī)學(xué)界的難題,它們的影響因素眾多,表現(xiàn)形式各樣,病因往往都不是非常明確,而且,近些年ENS疾病發(fā)病率呈現(xiàn)出增長(zhǎng)趨勢(shì),即使有些腸道神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)疾病可以通過(guò)外科手術(shù)的方式得到治療,但它們的術(shù)后并發(fā)癥或術(shù)后恢復(fù)情況仍會(huì)受到許多不明病因的影響,這些不被詳知的病因一直以來(lái)都是我們研究的對(duì)象。.Neuroligin1基因廣泛存在于人類和其它哺乳動(dòng)物的體內(nèi),且在ENS內(nèi)廣泛表達(dá),同時(shí)也發(fā)揮著重要的作用,我們此次科研的目的就是研究Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎的ENS中的表達(dá)情況,探討Neuroligin1基因的表達(dá)與ENS和ENS疾病之間的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)方法：分別取Wistar大鼠的胚胎第16(E16)、18(E18)、20(E20)天和出生第一天(B1)的胚鼠腸管標(biāo)本各30只,分別通過(guò)免疫熒光兩重標(biāo)記的染色技術(shù)、Western blot的技術(shù)、多聚核苷酸鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(實(shí)時(shí)熒光定量的)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)(Real-time Quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)、酶聯(lián)免疫吸附的實(shí)驗(yàn)技術(shù)(ELISA)、免疫組織化學(xué)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)(immunohi stochemi stry)等實(shí)驗(yàn)方法,研究Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎ENS各個(gè)發(fā)育時(shí)期中的表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在Wistar大鼠E16、E18、E20和B1四個(gè)ENS發(fā)育時(shí)期中：免疫熒光兩重標(biāo)記的染色技術(shù)顯示Neuroligin1基因陽(yáng)性面積的平均光密度值分別為E16 (0.046±0.031), E18(0.146±0.033), E20(0.233±0.034), Bl (0.345± 0.344),且四組之間的差別經(jīng)統(tǒng)計(jì)軟件處理證實(shí)有意義(F=441.614,P=-0.000,P0.05),同時(shí)在組組相比的過(guò)程中,平均蛋白濃度均有差別且經(jīng)統(tǒng)計(jì)軟件處理證實(shí)有意義(比較結(jié)果都符合P=-0.000,P0.05);Western blot顯示Neuroligin1基因的平均蛋白表達(dá)量分別為E16(0.053±0.025)、E18(0.146±0.024)、E20(0.249±0.034)、B1(0.533±0.049),且四組之間的差別經(jīng)統(tǒng)計(jì)軟件處理證實(shí)有意義(F=1070.296,P=0.000,P0.05),同時(shí)在組組相比的過(guò)程中,平均蛋白濃度均有差別且經(jīng)統(tǒng)計(jì)軟件處理證實(shí)有意義(比較結(jié)果都符合p=0.000,p0.05);qRT-PCR顯示Neuroligin1基因的mRNA目對(duì)平均濃度分別為E16(2.543±1.294)、E18(4.637±1.830)、E20(6.814±1.552)、B1(8.345±1.364),且四組之間的差別經(jīng)統(tǒng)計(jì)軟件處理證實(shí)有意義(F=81.440,P=-0.000,P0.05),同時(shí)在組組相比的過(guò)程中,平均mRNA濃度均有差別且經(jīng)統(tǒng)計(jì)軟件處理證實(shí)有意義(比較結(jié)果都符合p=0.000,p0.05);ELISA顯示Neuroligin1基因表達(dá)的蛋白平均濃度分別為E16(0.069±0.061)、E18(0.153±0.102)、 E20(1.087±0.093)、B1(1.678±0.085),且四組之間的差別經(jīng)統(tǒng)計(jì)軟件處理證實(shí)有意義(F=2396.068,p=0.000,K0.05),同時(shí)在組組相比的過(guò)程中,平均蛋白濃度均有差別且經(jīng)統(tǒng)計(jì)軟件處理證實(shí)有意義(比較結(jié)果都符合p=O.000,p0.05)；免疫組織化學(xué)技術(shù)顯示Neuroligin1基因表達(dá)的蛋白分別為E16(±～+)、 E18(+～++)、E20(++～+++)、B1 (+++～++++),表達(dá)量的大小順序?yàn)椋篍16E18E20B1；免疫熒光兩重標(biāo)記的染色技術(shù)、Western blot.qRT-PCR.ELISA和免疫組織化學(xué)技術(shù)中Neuroligin1基因的表達(dá)趨勢(shì)彼此一致。實(shí)驗(yàn)結(jié)論： 在E16到B1這段時(shí)期內(nèi),隨著Wistar大鼠ENS的發(fā)育,Neuroligin1在ENS的表達(dá)呈遞增趨勢(shì)；Neuroligin1在ENS的異常表達(dá)發(fā)生越早,相關(guān)疾病可能就越嚴(yán)重；Neuroligin1基因相關(guān)的ENS疾病可能是先天發(fā)育異常。
【關(guān)鍵詞】：Neuroligin1 大鼠胚胎 腸神經(jīng)系統(tǒng)疾病 表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R321
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 英文縮略詞表10-11
• 第一章 前言11-13
• 第二章 材料與方法13-30
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果30-31
• 第四章 討論31-33
• 第五章 結(jié)論33
• 第六章 本實(shí)驗(yàn)研究的不足之處33-34
• 第七章 對(duì)繼續(xù)研究的思考34-35
• 附圖及附表35-46
• 參考文獻(xiàn)46-51
• 致謝51-52
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文52-53
• 附件53

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：737387