本文關鍵詞：損傷POA和去除頸動脈竇對外周給AVP引起大鼠低溫的影響

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【摘要】：許多研究已經(jīng)證明,精氨酸加壓素(arginine vasopressin,AVP)在體溫調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要的作用。中樞給AVP能引起正常動物出現(xiàn)低溫反應,外周給AVP也可以降低正常體溫。我們研究發(fā)現(xiàn),內(nèi)源性AVP通過AVP V1a受體參與緊張性體溫調(diào)節(jié)過程,因為V1a受體阻斷劑可以提高大鼠在晝光期的體核溫度。有些學者已經(jīng)研究了AVP引起低體溫(低溫)的機制,中樞L-谷氨酸離子型受體通過影響尾部散熱而參與外周給AVP引起的低溫。另外,頸動脈竇壓力感受性反射也參與體核溫度和皮膚溫度的調(diào)控。我們實驗室最近發(fā)現(xiàn),外周給AVP引起低溫反應與其能抑制機體調(diào)節(jié)性產(chǎn)熱和提高唾液理毛行為的活動,使體表蒸發(fā)散熱增加有關。棕色脂肪(brown adipose tissue,BAT)是人和動物冷適應、非戰(zhàn)栗性產(chǎn)熱的主要來源,參與維持體溫和能量的平衡。BAT的產(chǎn)熱主要受交感神經(jīng)活動的調(diào)控。然而,關于外周給AVP引起低溫反應與支配BAT交感神經(jīng)活動變化的關系未見報道。因而,我們首先觀察了外周給AVP對體核溫度和BAT溫度的影響以及與支配BAT交感神經(jīng)活動變化的關系。然后,觀察了損傷下丘腦視前區(qū)(preoptic area,POA)對外周給AVP引起大鼠低溫反應與支配BAT交感神經(jīng)放電變化的影響。最后,觀察了外周給AVP對脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)引起發(fā)熱反應和支配BAT交感神經(jīng)放電變化的影響。旨在探討外周給AVP引起的降溫作用與支配BAT交感神經(jīng)活動變化的關系。第一部分損傷POA對外周給AVP引起大鼠低溫與支配BAT交感神經(jīng)放電變化的關系目的以往的研究證明,AVP可以引起嚙齒類和其他哺乳動物出現(xiàn)低溫反應,但損傷POA對外周給AVP引起大鼠的低溫以及對支配BAT交感神經(jīng)放電活動的影響未見報道。因而我們研究了損傷POA對外周給AVP引起大鼠低溫反應以及對支配BAT交感神經(jīng)放電活動的影響。方法實驗用SPF級成年雄性SD大鼠(200-340 g),將大鼠放在盛有木屑墊料的塑料鼠籠中單個飼養(yǎng),動物處于自由進食進水和自由活動的狀態(tài)。(1)使用卡因酸(kainic acid,KA)損傷大鼠POA。在22℃的環(huán)境中,用無線遙控測溫技術連續(xù)記錄大鼠體溫和活動的變化。上午10:00 h給大鼠腹腔注射AVP(10 ug/kg)或等容量的生理鹽水,觀察損傷POA對腹腔注射AVP引起大鼠體溫與活動變化的影響。(2)在大鼠背部肩胛間區(qū)切開皮膚暴露支配BAT交感神經(jīng),結(jié)扎支配BAT交感神經(jīng)的外周端并將其剪斷,再將支配BAT交感神經(jīng)中樞端放置在雙極銀電極上記錄交感神經(jīng)的放電活動。用成都泰盟軟件公司生產(chǎn)的BL-420S生物信號采集和分析系統(tǒng)記錄神經(jīng)信號。結(jié)果(1)假手術大鼠和損傷POA大鼠腹腔注射AVP 40 min后,體核溫度和BAT溫度均出現(xiàn)明顯的下降現(xiàn)象,但損傷POA大鼠引起的低溫反應幅度明顯小于假手術大鼠。(2)腹腔注射AVP后能快速降低大鼠支配BAT交感神經(jīng)的活動,在注射AVP30 min后,最大抑制作用達31.6%。給藥120 min后,支配BAT交感神經(jīng)放電活動恢復到接近基線水平。(3)損傷POA能減弱AVP對支配BAT交感神經(jīng)的活動的抑制作用,在注射AVP 30 min后,最大的抑制作用只有23.1%,給藥75 min后,支配BAT交感神經(jīng)放電活動恢復到接近基線水平。結(jié)論(1)POA是體溫調(diào)節(jié)的重要中樞,損傷POA能夠減弱AVP引起的低溫反應,提示腹腔注射AVP可能通過血腦屏障“漏入”POA引起降溫作用。損傷POA后并不能完全抑制AVP引起的降溫反應,說明可能還有其他途徑參與AVP的降溫反應。(2)AVP能明顯降低支配BAT交感神經(jīng)放電活動,而損傷POA能明顯減弱AVP對支配BAT交感神經(jīng)放電活動的抑制作用,因此,外周給AVP引起的低溫反應與AVP能通過POA抑制支配BAT交感神經(jīng)放電活動而引起B(yǎng)AT產(chǎn)熱減少有關。第二部分去除頸動脈竇對外周給AVP引起大鼠低溫作用的影響目的壓力感受器的興奮能引起皮膚交感縮血管神經(jīng)的緊張性,通過改變大鼠尾部血流量的變化,而調(diào)節(jié)機體散熱。因此,我們研究了去除頸動脈竇對AVP引起低溫的影響。旨在證明外周給AVP是否通過頸動脈竇壓力感受性途徑而使體溫降低。方法無線傳感器植入完成后,在頸部腹側(cè)區(qū)做一正中切口,剝離頸交感神經(jīng)和頸動脈鞘。在頸動脈分叉處連接的纖維組織上涂少量10%的苯酚乙醇溶液。假手術大鼠在頸部區(qū)域只做縱向切口。體溫和活動的測量同上述實驗方法。結(jié)果假手術大鼠腹腔注射AVP后,體溫出現(xiàn)明顯的下降現(xiàn)象。注射AVP 40 min后,體溫平均降低達1.95±0.23℃。而去除頸動脈竇能明顯減弱AVP引起的低溫反應,注射AVP 40 min后,體溫平均只降低1.26±0.32℃。注射生理鹽水后,體溫出現(xiàn)短暫的增加現(xiàn)象是由于移動動物和注射刺激引起的。結(jié)論去除頸動脈竇能夠減弱AVP引起的低溫反應,提示頸動脈竇壓力感受器(非體溫調(diào)節(jié)反射)參與外周給AVP引起的低溫反應。第三部分外周給AVP對脂多糖引起的發(fā)熱與支配BAT交感神經(jīng)放電變化的關系目的給發(fā)熱大鼠的中樞注射AVP能引起明顯的退熱反應,伴隨著產(chǎn)熱減少、散熱增加以及體溫降低。然而,外周給AVP對LPS引起大鼠發(fā)熱反應的影響與支配BAT交感神經(jīng)放電活動變化的關系未見報道。因此,我們觀察了腹腔注射AVP對LPS引起大鼠的發(fā)熱反應與支配BAT交感神經(jīng)放電活動的影響。方法(1)實驗用成年雄性SD大鼠,在22℃環(huán)境溫度下,明暗時間各為12 h,用無線遙控測溫技術連續(xù)記錄大鼠的體溫和活動的變化。上午10:00 h給大鼠腹腔注射LPS(50 ug/kg)或生理鹽水(1 ml/kg)90 min后,又給大鼠腹腔注射AVP(10ug/kg)或等容量的生理鹽水。(2)支配BAT交感神經(jīng)的放電活動同上述實驗方法,先記錄60 min交感神經(jīng)放電活動,給大鼠腹腔注射LPS(50 ug/kg)或生理鹽水(1 ml/kg)90 min后,給大鼠腹腔注射AVP(10 ug/kg)或等容量生理鹽水,繼續(xù)記錄支配BAT交感神經(jīng)的放電活動510 min。結(jié)果(1)給大鼠腹腔注射LPS(50 ug/kg)引起雙相發(fā)熱反應。注射LPS 90 min后體溫開始出現(xiàn)升高反應,160 min后出現(xiàn)第一熱峰(37.86±0.21℃),270 min后出現(xiàn)第二熱峰(38.58±0.18℃)。(2)注射AVP能迅速翻轉(zhuǎn)LPS的發(fā)熱反應,使體溫下降1.82℃,降溫反應持續(xù)105 min。注射AVP則使對照組大鼠體溫下降達2.32℃,降溫反應持續(xù)超過120 min。與AVP對正常大鼠降溫效應相比,AVP對LPS發(fā)熱大鼠的降溫效應恢復時間快。(3)腹腔注射LPS 90 min后,支配BAT交感神經(jīng)活動明顯增加,并引起雙相增加反應。注射LPS 160 min后交感神經(jīng)放電活動出現(xiàn)第一高峰期,280 min后出現(xiàn)第二高峰期。(4)腹腔注射AVP(10 ug/kg)能明顯減弱LPS對支配BAT交感神經(jīng)的興奮作用。結(jié)論本實驗結(jié)果表明:(1)給大鼠腹腔注射LPS(50 ug/kg)引起雙相發(fā)熱反應與支配BAT交感神經(jīng)放電活動出現(xiàn)雙相增加反應有關。(2)外周注射AVP(10ug/kg)明顯減弱LPS對支配BAT交感神經(jīng)活動的興奮作用,提示外周給AVP引起的退熱作用與AVP能夠抑制LPS發(fā)熱大鼠支配BAT交感神經(jīng)放電活動有關。
【關鍵詞】：下丘腦視前區(qū) 精氨酸加壓素 低溫 交感神經(jīng)放電 頸動脈竇壓力感受器 血壓 精氨酸加壓素 低溫 精氨酸加壓素 脂多糖 發(fā)熱 交感神經(jīng)放電
【學位授予單位】：成都醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R363
【目錄】：

• 摘要6-10
• Abstract10-16
• 前言16-20
• 第一部分 損傷POA對外周給AVP引起大鼠低溫與支配BAT交感神經(jīng)放電變化的關系20-47
• 1 材料與方法20-32
• 1.1 實驗動物20
• 1.2 實驗試劑及配制20-21
• 1.3 實驗器材21-22
• 1.4 腹腔植入無線遙測溫度傳感器22-23
• 1.5 體溫和活動的記錄23-24
• 1.6 損傷POA方法24-28
• 1.7 腹腔植入雙探頭無線遙測溫度傳感器28-29
• 1.8 體核溫度和BAT溫度的記錄29
• 1.9 記錄支配BAT交感神經(jīng)的放電活動29-31
• 1.10 實驗分組與步驟31-32
• 1.11 統(tǒng)計學方法32
• 2 結(jié)果32-43
• 2.1 損傷POA對外周給AVP引起大鼠低溫反應與活動變化的影響32-36
• 2.2 損傷POA對外周給AVP引起的低溫反應與BAT溫度變化的關系36-38
• 2.3 損傷POA對外周給AVP引起支配BAT交感神經(jīng)放電變化的關系38-43
• 3 討論43-47
• 第二部分 去除頸動脈竇對外周給AVP引起大鼠低溫作用的影響47-54
• 1 材料與方法47-48
• 1.1 實驗動物47
• 1.2 實驗試劑及配制47
• 1.3 腹腔植入無線遙測溫度傳感器47
• 1.4 去除頸動脈竇方法47-48
• 1.5 實驗分組與步驟48
• 1.6 統(tǒng)計學方法48
• 2 結(jié)果48-51
• 2.1 去除頸動脈竇對外周給AVP引起大鼠體溫變化的影響48-50
• 2.2 去除頸動脈竇對外周給AVP引起大鼠活動變化的影響50-51
• 3 討論51-54
• 第三部分 外周給AVP對脂多糖引起的發(fā)熱與支配BAT交感神經(jīng)放電變化的關系54-63
• 1 材料與方法54-56
• 1.1 實驗動物54
• 1.2 實驗試劑及配制54
• 1.3 腹腔植入無線遙測溫度傳感器54
• 1.4 記錄支配BAT交感神經(jīng)放電活動54-55
• 1.5 實驗分組與步驟55
• 1.6 統(tǒng)計學方法55-56
• 2 結(jié)果56-59
• 2.1 LPS對正常大鼠體溫的影響56
• 2.2 外周給AVP對LPS引起大鼠發(fā)熱反應的影響56-59
• 2.3 外周給AVP對LPS引起發(fā)熱大鼠支配BAT交感神經(jīng)放電活動變化的影響59
• 3 討論59-63
• 結(jié)論63-64
• 參考文獻64-68
• 文獻綜述68-77
• 參考文獻74-77
• 攻讀學位期間的研究成果77-78
• 致謝78

【參考文獻】

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本文編號：655873