應(yīng)用抑制性消減雜交篩選志賀菌基因轉(zhuǎn)移耐多藥相關(guān)基因
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更多相關(guān)文章: 志賀菌 基因轉(zhuǎn)移 耐多藥相關(guān)基因
【摘要】:目的:應(yīng)用抑制性消減雜交技術(shù)初步篩選志賀菌基因轉(zhuǎn)移耐多藥相關(guān)基因。方法:以志賀菌基因轉(zhuǎn)移耐多藥株DNA為檢測子,以其敏感株DNA為驅(qū)趕子,構(gòu)建DNA消減文庫,采用PCR鑒定及斑點雜交進行篩選,并隨機挑取陽性克隆測序,所得結(jié)果在GenBank中進行同源性比較和分析。結(jié)果:成功構(gòu)建了志賀菌基因轉(zhuǎn)移耐多藥株的特異性DNA消減雜交文庫。選取部分陽性克隆進行雜交篩選,其中5個測序成功,與GenBank數(shù)據(jù)庫進行初步比對,3個可能為新基因,2個為已知基因(Tn3926轉(zhuǎn)座子部分的轉(zhuǎn)座酶基因及23SrRNA核糖體核糖核酸)。結(jié)論:成功構(gòu)建了志賀菌基因轉(zhuǎn)移耐多藥株的特異性DNA消減雜交文庫并獲得了其耐多藥相關(guān)基因,提示轉(zhuǎn)座子介導的耐藥機制可能在志賀菌基因轉(zhuǎn)移耐多藥中起重要作用。
【作者單位】: 鄭州大學公共衛(wèi)生學院流行病學教研室;河南科技大學醫(yī)學院預防醫(yī)學教研室;
【關(guān)鍵詞】: 志賀菌 基因轉(zhuǎn)移 耐多藥相關(guān)基因
【基金】:河南省醫(yī)學科技攻關(guān)基金資助項目WKJ2007-2-024
【分類號】:R378
【正文快照】: 近年來,隨著抗生素的廣泛應(yīng)用甚至濫用,志賀菌菌株頻繁發(fā)生變異,產(chǎn)生耐藥株,且耐藥率高、耐藥產(chǎn)生速度快及范圍廣[1-2],給細菌性痢疾的防治帶來新的挑戰(zhàn),因此深入探討志賀菌耐多藥機制成為目前解決志賀菌耐多藥的先決條件。該實驗采用差異表達基因克隆技術(shù)抑制性消減雜交[3],
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