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免疫磁珠熒光量子點(diǎn)技術(shù)檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌

發(fā)布時(shí)間:2017-08-07 04:11

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【摘要】:目的篩選結(jié)核分枝桿菌(MTB)免疫磁珠熒光量子點(diǎn)檢測(cè)方法的最佳配體組合。方法將本室篩選獲得的MTB結(jié)合肽H8和商業(yè)化抗MTB多克隆抗體(Pab)與納米磁珠偶聯(lián),多肽H8、商業(yè)化抗MTB單克隆抗體(Mab)和抗熱休克蛋白65單克隆抗體(Mabc)與熒光量子點(diǎn)偶聯(lián),分別獲得2種免疫磁珠和三種功能化熒光量子點(diǎn),兩兩組合用于MTB檢測(cè),通過(guò)顯微鏡下觀察熒光信號(hào)以及激光誘導(dǎo)熒光儀測(cè)量熒光值,判斷不同配體組合與MTB的親和性及特異性,獲得最佳組合及其檢測(cè)下限。結(jié)果偶聯(lián)Mabc的熒光量子點(diǎn)與免疫磁珠MNP-Pab組合檢測(cè)MTB結(jié)果為陰性,其余5組均為陽(yáng)性。測(cè)量熒光值,檢測(cè)效果較好的兩組組合分別是MNP-Pab+QD-H8和MNP-H8+QD-H8,陽(yáng)性熒光值與陰性對(duì)照組比值分別是4.394和3.956,檢測(cè)下限均是102條菌/mL。6組組合與12種非結(jié)核分枝桿菌(NTM)的親和性各異,而與3種非分枝桿菌均不結(jié)合。結(jié)論 MNP-Pab+QD-H8和MNP-H8+QD-H8兩組檢測(cè)效果較好,與MTB親和性較高,特異性較好,可作為MTB免疫磁珠熒光量子點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)的最佳配體組合。
【作者單位】: 同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院結(jié)核病診療中心上海市結(jié)核病(肺)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;蘇州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院;同濟(jì)大學(xué)先進(jìn)材料與納米生物醫(yī)學(xué)研究院;山西省兒童醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心;
【關(guān)鍵詞】免疫磁珠 熒光量子點(diǎn) 分枝桿菌 結(jié)核 檢測(cè) 配體
【基金】:中央高;究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專(zhuān)項(xiàng)基金(1511219013) 上海市科委項(xiàng)目(No.10411955100,11nm0506100)聯(lián)合資助~~
【分類(lèi)號(hào)】:R378
【正文快照】: 結(jié)核病仍是威脅人類(lèi)健康的主要傳染病,目前市售的抗結(jié)核分枝桿菌(M.tuberculosis,MTB)抗體的特異性和敏感性均不高,因此,國(guó)內(nèi)外均在尋找新的MTB標(biāo)識(shí)物,建立檢測(cè)MTB新方法[1-2]。近年來(lái),納米技術(shù)已經(jīng)廣泛用于普通細(xì)菌的檢測(cè)中[3],在MTB檢測(cè)中也開(kāi)展了一些研究[4],我們利用前期

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 崔振玲;王潔;胡忠義;;液體培養(yǎng)基比色法快速檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌耐藥性[J];中國(guó)抗生素雜志;2006年09期

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【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

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2 楊麗霞;胡國(guó)信;方銘;張倫理;;顯微鏡觀察藥物敏感性檢測(cè)技術(shù)在結(jié)核性腦膜炎診斷及其耐藥性檢測(cè)中的應(yīng)用[J];江西醫(yī)藥;2012年06期

3 史可云;王潔;楊華;張文宏;翁心華;胡忠義;;三種方法檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌吡嗪酰胺耐藥性的比較[J];中華傳染病雜志;2007年02期

4 楊華;王潔;周新剛;崔振玲;陸俊梅;胡忠義;;噬菌體生物擴(kuò)增法和最低抑菌濃度法檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌氧氟沙星耐藥性[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2007年04期

5 邢愛(ài)英;劉忠泉;賈紅彥;古淑香;張宗德;;噬菌體硝酸鹽還原實(shí)驗(yàn)方法的建立與評(píng)估[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);2009年04期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

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2 金文國(guó);結(jié)核分枝桿菌顯微鏡觀察藥敏檢測(cè)技術(shù)研究及其應(yīng)用[D];蘇州大學(xué);2009年

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4 劉忠華;丁元生;畢愛(ài)笑;馮永紅;金瑞良;楊華;秦蓮花;胡忠義;;結(jié)核分枝桿菌38kD-16kD融合蛋白克隆表達(dá)及血清學(xué)診斷價(jià)值[J];中國(guó)防癆雜志;2009年10期

5 王彥,王庭祥,張晨鈺,鐘麗英,李文華,張彩云,鄭志清;應(yīng)用硝酸鹽還原實(shí)驗(yàn)建立快速結(jié)核分枝桿菌藥物敏感分析方法[J];中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2005年04期

6 范超明;李偉;樊德利;鄭小銀;丁建祖;;結(jié)核桿菌重組基因16kD-38kD融合蛋白診斷結(jié)核病的應(yīng)用價(jià)值[J];中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2010年10期

【相似文獻(xiàn)】

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1 辛忠濤,李君文,王新為,宋農(nóng),鄭金來(lái),王中民,靳連群;一步多重PCR同時(shí)檢測(cè)甲型肝炎和脊髓灰質(zhì)炎病毒研究[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2000年04期

2 孫逢明;端粒酶活性檢測(cè)方法的研究概況[J];海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2001年05期

3 李斯明,葉春婷,鄒海燕,彭燕豪,楊小紅;高純度豬軟骨II型膠原的制備與檢測(cè)[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2001年04期

4 婁沂春;使用中的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)儀的溫度分布及維護(hù)[J];實(shí)驗(yàn)室研究與探索;2001年02期

5 聶練兵;轉(zhuǎn)基因作物及其檢測(cè)技術(shù)與安全性評(píng)價(jià)問(wèn)題[J];種子科技;2001年03期

6 胡清海,劉曉文,趙世華,張知良,丁鏟,苗晉鋒,劉華雷,趙東偉;應(yīng)用PCR技術(shù)檢測(cè)鴨疫里默氏桿菌的研究[J];中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2002年06期

7 劉競(jìng)麗,李勁頻;檢測(cè)T細(xì)胞受體重排切除環(huán)的意義及應(yīng)用研究[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).免疫學(xué)分冊(cè);2002年04期

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4 陳巖;陳洪俊;;如何用分子數(shù)據(jù)進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系分析[A];昆蟲(chóng)學(xué)研究進(jìn)展[C];2005年

5 李雪梅;程安春;汪銘書(shū);;間接原位RT-PCR檢測(cè)石蠟切片中PRRSV核酸方法的建立[A];第六屆全國(guó)會(huì)員代表大學(xué)暨第11次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集(上)[C];2005年

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8 俞雅萍;;細(xì)胞凋亡的機(jī)制及途徑和影響因素[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2006年

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1 記者 連雅婕 通訊員 于柏林 于洋;長(zhǎng)春應(yīng)化所 檢測(cè)蛋白質(zhì)有了新方法[N];長(zhǎng)春日?qǐng)?bào);2010年

2 徐錚奎;寡核苷配體研發(fā)突飛猛進(jìn)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

3 本報(bào)記者 張淑義 通訊員 李冬燕;H5亞型禽流感病毒檢測(cè)再提速[N];中國(guó)國(guó)門(mén)時(shí)報(bào);2010年

4 楊蕾;蛋白質(zhì)分離檢測(cè)關(guān)鍵技術(shù)研究獲突破[N];中國(guó)食品報(bào);2010年

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7 記者 姚琳 通訊員 韋萬(wàn)春;靈長(zhǎng)類(lèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢測(cè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室通過(guò)驗(yàn)收[N];廣西日?qǐng)?bào);2011年

8 通訊員 梁淡麗 記者 劉傳書(shū);為人類(lèi)基因組結(jié)構(gòu)變異檢測(cè)提供新方法[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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5 樓凱凱;ATP生物發(fā)光法檢測(cè)微生物總量及其自動(dòng)原位分析的研究[D];浙江大學(xué);2006年

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7 岳田芳;海藻希瓦氏菌發(fā)酵產(chǎn)生河豚毒素的提取與檢測(cè)[D];中國(guó)海洋大學(xué);2008年

8 田明堯;多亞型流感和新城疫病毒診斷基因芯片的初步研究[D];吉林大學(xué);2008年

9 王宏魁;河南株P(guān)PV的分離鑒定及VP2基因的克隆與序列分析[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

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本文編號(hào):632772

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