本文關鍵詞：Wnt3a過表達對小鼠胚胎肝干細胞凋亡的抑制作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究Wnt3a對ELSC14.5小鼠胚胎肝干細胞凋亡及相關蛋白表達的影響。方法采用表達綠色熒光蛋白的腺病毒載體系統(tǒng)(Ad-GFP-Wnt3a)轉入小鼠ELSC14.5細胞,以Ad-GFP組為空白對照組,Ad-wnt3a組為實驗組。實時定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法檢測Wnt3a及凋亡相關因子Bax、Bcl-2、Mcl-1的mRNA和蛋白的表達;Hoechst33258染色法結合annexin-PE/7-ADD法檢測細胞的凋亡情況。結果 qRT-PCR和Western blot結果顯示,Wnt3a在ELSC14.5細胞中特異性表達,表明腺病毒系統(tǒng)Ad-Wnt3a能高效感染ELSC14.5細胞。與對照組相比,抗凋亡因子Bcl-2、mcl-1的mRNA和蛋白的表達顯著升高(P0.05),而促凋亡因子Bax的mRNA和蛋白的表達顯著降低(P0.05)。Hoechst33258染色結合annexin-PE/7-ADD法結果顯示,Wnt3a高表達的ELSC14.5細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染的細胞數量很少,細胞凋亡率降低。結論 Wnt3a通過上調Bcl-2家族中抗凋亡因子和下調促凋亡因子來抑制小鼠胚胎肝干細胞的凋亡,延長其生存。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學分子醫(yī)學與腫瘤研究中心;重慶醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院病理生理學教研室;
【關鍵詞】： 胚胎肝干細胞 抗凋亡 Wnta
【基金】：國家自然科學基金(81071770,81201679)
【分類號】：R329
【正文快照】： 肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界范圍內最常見和最致命的癌癥之一。臨床上,肝癌診療中存在著惡性程度極高、預后極差、治療缺乏針對性等問題[1]。因此,研究肝癌分子發(fā)病機制尤為重要和迫切。經典Wnt信號途徑的異常激活會導致肝癌的發(fā)生[2]。目前,經典Wnt信號通

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前1條

1 郭俊;楊華強;;Mcl-1分子研究進展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2012年02期

【二級參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前1條

1 宋倫,黎燕,孫英勛,沈倍奮;Mcl-1介導去因子饑餓誘導的人骨髓病細胞系XG-7凋亡(英文)[J];Chinese Medical Journal;2002年08期

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 趙四海;鄭華東;楚雍烈;林燕;張春芳;陳正蘭;朱虹;楊鵬輝;劉恩岐;;兩種小鼠胚胎移植方法的比較[J];第四軍醫(yī)大學學報;2007年06期

2 吳珊珊;趙海波;武雁;張建芳;陳必良;;褪黑素對小鼠2-細胞期胚胎發(fā)育的影響[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2011年06期

3 應樂華;;胚胎生長中三種重要的物質[J];國外醫(yī)學情報;1980年19期

4 郭勁;陳朝倫;周宜男;楊冰梅;;烏拉坦對小鼠胚胎肝細胞發(fā)育分化的影響[J];新疆醫(yī)科大學學報;1993年01期

5 周生來;董婉維;鄭志紅;楊葳;張梅英;史曉萍;王祿增;;胚胎冷凍技術應用于抗菌肽轉基因小鼠的保種傳代[J];中國比較醫(yī)學雜志;2007年08期

6 姜秋;倪雪巖;聶代邦;孫宏晨;;小鼠胚胎成纖維細胞的轉染與陽性細胞的初步篩選[J];吉林大學學報(醫(yī)學版);2008年06期

7 朱勛兵;周建生;肖玉周;鄧廉夫;;低氧誘導因子-1α在長骨發(fā)育中的表達研究[J];中國骨傷;2009年08期

8 王利紅;連方;;兩種2-細胞鼠胚體外培養(yǎng)方法比較[J];中國比較醫(yī)學雜志;2009年11期

9 秦燕霞;李京敏;馮國營;霍冠華;;發(fā)育中小鼠腎淋巴管內皮細胞透明質酸受體-1~+細胞的研究[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志;2010年22期

10 施斐曼;丁穎;付生法;劉永;;造血干細胞發(fā)生學研究 Ⅳ.小鼠胚胎早期造血的探索[J];細胞生物學雜志;1986年04期

中國重要會議論文全文數據庫 前10條

1 謝利劍;黃國英;趙曉晴;齊春華;彭濤;周國民;;Cx40、Cx45在Cx43基因敲除小鼠胚胎心臟時表達的研究[A];中華醫(yī)學會第十四次全國兒科學術會議論文匯編[C];2006年

2 倪華;;小鼠胚胎著床的分子調控[A];中國生理學會張錫鈞基金會第八屆全國青年優(yōu)秀生理學學術論文綜合摘要[C];2003年

3 謝利劍;黃國英;趙曉晴;齊春華;彭濤;周國民;;Cx40、Cx45在Cx43基因敲除小鼠胚胎心臟時空表達的研究[A];2006（第三屆）江浙滬兒科學術會議暨浙江省兒科學術年會論文匯編[C];2006年

4 黃麗芳;周琨;胡采紅;王芳;孫漢英;劉文勵;;E10～E12期間小鼠胚胎心臟內皮細胞特性及與造血干細胞擴增相關分子變化水平的研究[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

5 黃昕;;促血小板生成素(TPO)在小鼠胚胎期造血中的作用機制[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

6 趙義清;章漢旺;;STAT3在小鼠胚胎圍著床期子宮內膜的表達與活化[A];第一屆中華醫(yī)學會生殖醫(yī)學分會、中國動物學會生殖生物學分會聯(lián)合年會論文匯編[C];2007年

7 李均;汪維偉;;小鼠胚胎消化管上皮細胞凋亡相關基因表達的初步觀察[A];解剖學雜志——中國解剖學會2002年年會文摘匯編[C];2002年

8 戴冀斌;王曉蕓;柯國平;袁華;朱叢麗;田毅浩;徐進;;小鼠胚胎中樞神經系干細胞的分離、純化和培養(yǎng)[A];解剖學雜志——中國解剖學會2002年年會文摘匯編[C];2002年

9 方妮;侯春梅;劉兵;毛寧;;小鼠胚胎背主動脈區(qū)基質細胞體外培養(yǎng)建系及生物學特性的研究[A];第11次中國實驗血液學會議論文匯編[C];2007年

10 楊艷萍;李海榮;景雅;;小鼠胚胎心臟流出道分隔過程中心肌細胞轉分化和心內膜α-SMA陽性細胞的發(fā)育[A];解剖學雜志——中國解剖學會2002年年會文摘匯編[C];2002年

中國重要報紙全文數據庫 前10條

1 張忠霞;首次!大鼠胚胎中成功提取干細胞[N];醫(yī)藥經濟報;2009年

2 麥迪信;克隆技術將腫瘤轉化為胚胎[N];醫(yī)藥經濟報;2003年

3 劉紅 李連達;干細胞移植——帕金森病遭遇終結者？[N];醫(yī)藥經濟報;2002年

4 王世煥 支勇平;我國人類胚胎干細胞克隆研究結碩果[N];中國醫(yī)藥報;2001年

5 張樂;胚胎干細胞用于構建新藥篩選模型[N];醫(yī)藥經濟報;2002年

6 琳琳;干細胞有望修復肺損傷[N];中國醫(yī)藥報;2002年

7 吳理茂 李連達;中藥在心肌細胞移植中的作用[N];中國醫(yī)藥報;2003年

8 馮衛(wèi)東;造血干細胞分子起源被揭示[N];中國中醫(yī)藥報;2009年

9 記者 馮衛(wèi)東;美揭示造血干細胞分子起源[N];科技日報;2009年

10 本報特約撰稿人 陸志城;輔助生殖技術的前沿之爭[N];醫(yī)藥經濟報;2003年

中國博士學位論文全文數據庫 前10條

1 王冬梅;Lin～-CD_(34)～-細胞cDNA消減文庫的構建及Humanin在造血系統(tǒng)中抗凋亡的實驗研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2003年

2 聶麗;ATP敏感性鉀通道在小鼠胚胎心臟發(fā)育過程的發(fā)育依賴性變化及功能[D];華中科技大學;2012年

3 師偉;Wnt3a基因對臍血來源CD34～+造血干/祖細胞體外擴增及定向分化作用的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2006年

4 鈕煒西;小鼠胚胎臍血管的造血功能研究[D];第三軍醫(yī)大學;2012年

5 井然;Cypher和ENH在小鼠早期心臟發(fā)育中的作用及其分子機制[D];中南大學;2012年

6 高嬌;小鼠胚胎造血前體細胞的表面標志研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2011年

7 黃麗芳;小鼠胚胎E10～E12造血擴增部位的探尋及其分子作用機制的研究[D];華中科技大學;2009年

8 楊艷萍;胚胎心臟流出道的分隔與重塑[D];山西醫(yī)科大學;2009年

9 李海榮;胚胎心臟流出道、靜脈竇及傳導系的發(fā)生發(fā)育[D];山西醫(yī)科大學;2008年

10 喬愛秀;胚胎心臟傳導系的發(fā)育[D];山西醫(yī)科大學;2012年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 葉勁;Wnt3a聯(lián)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白2對骨髓間充質干細胞增殖及成骨分化的影響[D];華中科技大學;2011年

2 毛元江;Wnt3a蛋白調控大鼠骨髓間充質干細胞向成骨細胞分化的研究[D];華中科技大學;2010年

3 李韌;小鼠胚胎循環(huán)血的造血潛能分析[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2011年

4 周帆;小鼠胚胎定向造血發(fā)育的表面標志研究[D];安徽醫(yī)科大學;2013年

5 馮先玲;轉錄因子Nkx2.5、ISL-1的表達與小鼠胚胎心臟的早期發(fā)育[D];山西醫(yī)科大學;2010年

6 王亞薇;脂肪基質干細胞分化為多巴胺能神經元過程中Wnt3a表達的變化[D];河北聯(lián)合大學;2011年

7 侯毅鞠;凋亡抑制因子Svv基因的構建及其原核表達[D];第四軍醫(yī)大學;2004年

8 孫欣欣;Wnt3a/LRP5信號傳導通路對ST2細胞增殖和分化的影響[D];山東大學;2005年

9 王晉麗;大鼠骨髓間充質干細胞向膽堿能樣神經元的分化及其過程中Wnt3a表達的研究[D];山西醫(yī)科大學;2008年

10 陳冬波;CD43表達與造血干細胞發(fā)育的相關性研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2011年

  本文關鍵詞：Wnt3a過表達對小鼠胚胎肝干細胞凋亡的抑制作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：492132