本文關(guān)鍵詞：α-甲基-DL-酪氨酸對(duì)黑腹果蠅腦內(nèi)酪氨酸羥化酶含量及行為活動(dòng)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：多巴胺(dopamine,DA)是一種兒茶酚胺遞質(zhì),在進(jìn)化過(guò)程中高度保守。酪氨酸羥化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)作為多巴胺合成過(guò)程中的第一個(gè)酶,同時(shí)也是重要的限速酶,可以作為多巴胺能神經(jīng)元的特異性標(biāo)志以確定其分布模式。α-甲基-DL-酪氨酸(α-MT)是TH的一種有效抑制劑,在體內(nèi)通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性抑制來(lái)降低腦內(nèi)多巴胺水平。多巴胺信號(hào)的改變與人類神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,如帕金森病(Parkinson’s disease,PD)密切關(guān)聯(lián)。帕金森病是一種典型的神經(jīng)退行性疾病,常伴隨震顫、運(yùn)動(dòng)遲緩等癥狀。黑腹果蠅(Drosophila melanogaster)對(duì)帕金森病關(guān)于其疾病機(jī)制的理解提供了顯著的貢獻(xiàn)。然而,目前關(guān)于帕金森病果蠅模型中多巴胺能神經(jīng)元缺失的不同報(bào)告中卻出現(xiàn)了互相矛盾的結(jié)果。本研究以黑腹果蠅這一經(jīng)典模型生物作為實(shí)驗(yàn)材料,分別喂食濃度為0.5m M,0.75mM和1.0mM的α-MT抑制劑,在生長(zhǎng)發(fā)育和負(fù)趨地性等生理活動(dòng)方面與正常果蠅進(jìn)行對(duì)比,結(jié)合免疫組化反應(yīng)結(jié)果來(lái)確定黑腹果蠅腦內(nèi)TH的分布情況,推測(cè)不同腦區(qū)多巴胺能神經(jīng)元的生理功能。試驗(yàn)結(jié)果表明,α-MT能夠引起果蠅腦中TH陽(yáng)性神經(jīng)元的缺失,這種缺失對(duì)果蠅的生理活動(dòng)產(chǎn)生顯著影響。這種影響主要表現(xiàn)為,α-MT對(duì)黑腹果蠅的生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生抑制作用,其生長(zhǎng)周期隨著α-MT濃度的增大而逐漸延長(zhǎng),胚胎存活率、化蛹率和羽化的成蠅數(shù)量隨之減少�；计陂g,不同濃度的實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的整體化蛹趨勢(shì)相同,但不同濃度的α-MT對(duì)黑腹果蠅蛹的長(zhǎng)度影響均不顯著(P=0.189)。使用α-MT處理的黑腹果蠅負(fù)趨地性能力明顯下降,同時(shí)出現(xiàn)翅膀震顫、旋轉(zhuǎn)行為等帕金森病的癥狀。通過(guò)裝置標(biāo)線的果蠅平均數(shù)目,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組相比差異均極顯著(P0.01)。免疫組化反應(yīng)結(jié)果顯示不同濃度施藥組出現(xiàn)了不同程度的TH陽(yáng)性神經(jīng)元的缺失。濃度為1.0mM的實(shí)驗(yàn)組黑腹果蠅缺失前腦后方外側(cè)的PPL1細(xì)胞群。隨著α-MT濃度的增大,束膜處的PAM細(xì)胞群存在不同程度的缺失,視葉區(qū)域的細(xì)胞群和纖維投射也隨抑制劑濃度的增大而呈現(xiàn)明顯缺失。推測(cè)PPL1細(xì)胞群可能與果蠅的運(yùn)動(dòng)能力有關(guān),PAM細(xì)胞群可能作為神經(jīng)激素調(diào)節(jié)果蠅的生長(zhǎng)發(fā)育,視葉中的多巴胺能神經(jīng)元可能作為神經(jīng)調(diào)質(zhì)及神經(jīng)遞質(zhì)發(fā)揮其生理功能。本次試驗(yàn)通過(guò)構(gòu)建帕金森病果蠅模型,研究α-MT對(duì)黑腹果蠅腦內(nèi)TH含量及其行為活動(dòng)的影響,揭示了果蠅的自發(fā)運(yùn)動(dòng)和多巴胺能神經(jīng)元之間的關(guān)系,推斷黑腹果蠅腦中不同區(qū)域內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元可能具有的生理功能,為深入研究多巴胺能神經(jīng)元缺失引起的神經(jīng)性疾病(如帕金森病)的病理機(jī)制的研究提供一些理論數(shù)據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：黑腹果蠅 酪氨酸羥化酶 抑制劑 行為失調(diào) 免疫組織化學(xué)
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R742.5;R-332
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 1 引言9-12
• 2 實(shí)驗(yàn)材料和方法12-15
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料12-13
• 2.1.1 果蠅的培養(yǎng)12
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)果蠅的培養(yǎng)12
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)藥品12
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器12-13
• 2.2 黑腹果蠅生殖能力測(cè)定13
• 2.3 黑腹果蠅運(yùn)動(dòng)分析13
• 2.4 統(tǒng)計(jì)與分析13-14
• 2.5 黑腹果蠅腦切片的制備14
• 2.6 抗體的來(lái)源和特性14
• 2.7 免疫組化過(guò)程14-15
• 3 結(jié)果15-23
• 3.1 試驗(yàn)梯度濃度的選擇15
• 3.2 實(shí)驗(yàn)果蠅生殖能力測(cè)定15-18
• 3.2.1 黑腹果蠅首次出現(xiàn)幼蟲(chóng)、化蛹和成蠅的時(shí)間15-17
• 3.2.2 黑腹果蠅每日化蛹的數(shù)量17
• 3.2.3 黑腹果蠅蛹的長(zhǎng)度測(cè)定17-18
• 3.3 實(shí)驗(yàn)果蠅運(yùn)動(dòng)能力測(cè)定18-19
• 3.4 黑腹果蠅水平切TH神經(jīng)元免疫組化反應(yīng)模式19-23
• 3.4.1 對(duì)照組果蠅水平切TH神經(jīng)元免疫組化反應(yīng)模式19-21
• 3.4.2 α-MT抑制劑處理的果蠅水平切TH神經(jīng)元免疫組化反應(yīng)模式21-23
• 4 討論23-29
• 4.1 α-MT致使黑腹果蠅生長(zhǎng)周期延緩甚至停止23-24
• 4.2 α-MT使黑腹果蠅運(yùn)動(dòng)能力降低伴隨帕金森病癥狀24-25
• 4.3 α-MT處理的黑腹果蠅腦內(nèi)DA（TH）神經(jīng)元部分缺失25-27
• 4.4 果蠅帕金森病模型的科學(xué)意義27-29
• 5 結(jié)論29-31
• 參考文獻(xiàn)31-35
• 縮略語(yǔ)35-36
• 圖版說(shuō)明36-38
• 圖版38-41
• 致謝41

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