本文關(guān)鍵詞：運(yùn)動(dòng)激活自噬相關(guān)信號(hào)通路對(duì)阿爾茨海默病模型大鼠的影響研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的:目前我國已進(jìn)入老齡化社會(huì),神經(jīng)退行性疾病發(fā)病率明顯上升,已成為繼癌癥、心腦血管病、糖尿病后第四大影響國民體質(zhì)健康的疾病。阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)又稱老年性癡呆,是一種多發(fā)生在老年,以進(jìn)行性認(rèn)知障礙和記憶能力損傷為主要臨床癥狀的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,目前我國AD發(fā)病率明顯呈上升趨勢(shì),而適宜負(fù)荷的運(yùn)動(dòng)被認(rèn)為是非藥物干預(yù)AD的一種有效策略。近年來,一種新的細(xì)胞自殺性死亡方式-自噬(autophagy)引起人們廣泛的注意,通過自噬途徑可以使功能障礙的細(xì)胞器或異常折疊的蛋白質(zhì)得到有效降解,在維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)方面發(fā)揮重要作用。但運(yùn)動(dòng)對(duì)AD神經(jīng)元自噬相關(guān)通路的影響目前研究還很少,其機(jī)制有待于進(jìn)一步闡明。本研究擬探討長(zhǎng)期中等負(fù)荷的運(yùn)動(dòng)刺激對(duì)D-半乳糖注射致AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及海馬神經(jīng)元自噬相關(guān)信號(hào)通路的影響及分子機(jī)制,為研究探索AD發(fā)病機(jī)制和治療方案開辟新的思路。研究方法:本研究選取2月齡雄性SD大鼠為研究對(duì)象,實(shí)驗(yàn)前,隨機(jī)將大鼠分為4組,即正常對(duì)照組(Normal Control Group,NC組)、運(yùn)動(dòng)對(duì)照組(Exercise Control Group,EC組)、AD模型對(duì)照組(Alzheimer Control Group,AC組)、AD模型訓(xùn)練組(Alzheimer Exercise Group,AE組),每組20只。NC組按常規(guī)飼養(yǎng),自由活動(dòng),每日上午腹腔注射1次生理鹽水(150 mg/kg),共8周;AC組按常規(guī)喂養(yǎng),自由活動(dòng),每日上午腹腔注射1次D-半乳糖(150 mg/kg),共8周;AE組除每日腹腔注射D-半乳糖(150 mg/kg)外,還進(jìn)行跑臺(tái)訓(xùn)練,共8周。大鼠訓(xùn)練方案為:第1周跑速10 m/min,30min/d,6d/w,周日休息;第2-4周跑速15 m/min,45min/d,6d/w,周日休息;第5-8周跑速15 m/min,60min/d,6d/w,周日休息;EC組的訓(xùn)練方案同AE組,也持續(xù)8周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,通過Morris水迷宮檢測(cè)各組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力;Nissl法檢測(cè)海馬神經(jīng)元存活狀態(tài);Golgi法檢測(cè)海馬神經(jīng)元樹突密度;免疫熒光染色檢測(cè)磷酸化AMPK表達(dá);化學(xué)比色法測(cè)定海馬組織超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽過氧化氫酶(GSH)含量;Western blot法檢測(cè)P-AMPK、LC3I、LC3II、Beclin-1、P-Akt和Bcl-2的表達(dá)。采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,所有數(shù)據(jù)均以sx?表示,兩組數(shù)據(jù)比較使用t檢驗(yàn),多組比較采用方差分析,P0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。研究結(jié)果:定位航行實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,各組大鼠的Morris水迷宮逃避潛伏期隨實(shí)驗(yàn)時(shí)間的增加都有下降的趨勢(shì)。在實(shí)驗(yàn)的第3、4、5天,AC組和AE組逃避潛伏期與NC組比較,明顯增加(p0.05,p0.01)。在實(shí)驗(yàn)第5天,AE組逃避潛伏期與AC組比較,明顯降低(p0.01)。與NC組相比,AC組在目標(biāo)象限停留的時(shí)間明顯降低(p0.01),穿越原平臺(tái)位置次數(shù)也顯著減少(p0.01),表明AC組大鼠的空間探索能力與NC組相比明顯減弱。與AC組比較,AE組在目標(biāo)象限停留的時(shí)間明顯變長(zhǎng)(p0.05),穿越原平臺(tái)位置的次數(shù)也顯著增加(p0.01)。Nissle染色顯示,NC組與EC組神經(jīng)元飽滿,細(xì)胞邊界清晰,細(xì)胞排列緊密;AC組神經(jīng)元排列稀疏,細(xì)胞邊界模糊,細(xì)胞核出現(xiàn)大量固縮;AE組神經(jīng)元部分細(xì)胞核也出現(xiàn)固縮,但細(xì)胞排列較清晰、緊密。Golgi染色結(jié)果表明,AC組海馬神經(jīng)元側(cè)樹突數(shù)目較NC組顯著減少(p0.01),但AE組大鼠神經(jīng)元側(cè)樹突數(shù)目較AC組和NC顯著增加(p0.01,p0.05);免疫熒光染色顯示,AE組海馬組織P-AMPK被激活;酶活性檢測(cè)結(jié)果表明,AE組海馬組織SOD活性明顯提高(P0.01),MDA含量顯著降低(P0.01),但GSH活性表達(dá)無明顯差異(P0.05);Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示,與NC組比較,AC組P-AMPK蛋白表達(dá)明顯降低(p0.01),AE組P-AMPK表達(dá)較NC組和AC組明顯增強(qiáng)(p0.01)。AE組LC3II/LC3I比值較NC組和AC組明顯增強(qiáng)(p0.01),其余三組LC3II/LC3I比值無顯著性差異。與NC組相比,EC組和AE組Beclin-1蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng)(p0.01),AC組Beclin-1蛋白表達(dá)明顯降低(p0.01);與AC組相比,AE組Beclin-1蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng)(p0.01)。與AC組相比,AE組P-Akt、Bcl-2蛋白表達(dá)明顯增加。研究結(jié)論:(1)8周的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)可明顯改善AD模型大鼠的學(xué)習(xí)和和記憶能力,這與AD大鼠海馬CAI區(qū)神經(jīng)元損傷數(shù)量減少和海馬神經(jīng)元樹突密度增加密切相關(guān)。(2)8周的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)可激活A(yù)D大鼠神經(jīng)元磷酸化AMPK的表達(dá),進(jìn)而引起神經(jīng)元自噬,表現(xiàn)為自噬的標(biāo)志性蛋白LC3與Beclin-1在海馬神經(jīng)元表達(dá)明顯增加。(3)8周的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)可以通過提高AD大鼠海馬組織SOD的活性,降低MDA的沉積從而保護(hù)AD大鼠的神經(jīng)元。(4)8周的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)可提Akt\Bcl-2信號(hào)通路的表達(dá),從而促進(jìn)神經(jīng)元存活。
【關(guān)鍵詞】：運(yùn)動(dòng) 阿爾茨海默病 AMP依賴的蛋白激酶 自噬
【學(xué)位授予單位】：西安體育學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R749.16;R-332
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-10
• 1 前言10-11
• 1.1 選題依據(jù)10
• 1.2 研究目的意義10-11
• 2 文獻(xiàn)綜述11-24
• 2.1 自噬與神經(jīng)退行性疾病11-13
• 2.1.1 自噬體的結(jié)構(gòu)11-12
• 2.1.2 自噬與AD12
• 2.1.3 自噬參與神經(jīng)元保護(hù)性治療12-13
• 2.2 自噬對(duì)PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路的調(diào)控作用13-16
• 2.2.1 mTOR信號(hào)通路在自噬參與神經(jīng)退行性疾病的意義13-15
• 2.2.2 PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路在自噬調(diào)節(jié)細(xì)胞生存機(jī)能中的作用15-16
• 2.3 AMPK信號(hào)通路與AD及自噬的關(guān)系16-24
• 2.3.1 AMPK的結(jié)構(gòu)及主要功能16-17
• 2.3.2 AMPK通過調(diào)節(jié)mTOR信號(hào)通路影響細(xì)胞自噬17-18
• 2.3.3 AMPK在調(diào)控衰老過程中的作用18-19
• 2.3.4 AMPK控制抗衰老的信號(hào)網(wǎng)絡(luò)19
• 2.3.5 AMPK與CRTC-1/CREB信號(hào)19-20
• 2.3.6 AMPK與SIRT1信號(hào)20-21
• 2.3.7 AMPK與FOXO軸21-23
• 2.3.8 AMPK與p53途徑23-24
• 2.4 總結(jié)24
• 3 研究對(duì)象與方法24-28
• 3.1 研究對(duì)象24
• 3.2 研究材料24-25
• 3.2.1 主要試劑24-25
• 3.2.2 主要儀器25
• 3.3 研究方案25-26
• 3.4 測(cè)試方法26-28
• 3.4.1 大鼠行為學(xué)測(cè)試26-27
• 3.4.2 海馬CAI區(qū)Nissle染色27
• 3.4.3 大鼠海馬區(qū)Golgi染色27
• 3.4.4 海馬CAI區(qū)P-AMPK免疫熒光染色27-28
• 3.4.5 氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測(cè)28
• 3.4.6 Western Blot檢測(cè)28
• 3.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析28
• 4 研究結(jié)果28-33
• 4.1 大鼠行為學(xué)測(cè)試結(jié)果28-29
• 4.1.1 各組大鼠定位航行實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-29
• 4.1.2 各組大鼠空間探索成績(jī)比較29
• 4.2 大鼠海馬CAI區(qū)神經(jīng)元Nissle染色結(jié)果29-30
• 4.3 大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元Golgi染色結(jié)果30-31
• 4.4 大鼠海馬CA1區(qū)P-AMPK免疫熒光染色結(jié)果31
• 4.5 各組大鼠海馬組織氧化應(yīng)激指標(biāo)測(cè)定結(jié)果31
• 4.6 Western Blot檢測(cè)結(jié)果31-33
• 5 討論與分析33-38
• 5.1 AD大鼠模型的建立及運(yùn)動(dòng)干預(yù)對(duì)其學(xué)習(xí)記憶功能的影響33-35
• 5.2 運(yùn)動(dòng)對(duì)AD大鼠海馬神經(jīng)元突觸及氧化應(yīng)激的影響35-36
• 5.3 運(yùn)動(dòng)對(duì)AMPK的激活和自噬對(duì)AD的影響36-38
• 6 結(jié)論38-39
• 致謝39-40
• 參考文獻(xiàn)40-46
• 攻讀學(xué)位期間取得的研究成果46-47

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳同度,張昌穎;素食大鼠的貧血現(xiàn)象[J];營養(yǎng)學(xué)報(bào);1957年04期

2 陳偉強(qiáng);趙善廣;;自制注射用大鼠固定裝置[J];上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué);1992年04期

3 肖柳英,林培英,馮昭明,張丹;不同周齡的SD大鼠生理、生化及體重的正常值測(cè)定[J];中藥新藥與臨床藥理;1996年03期

4 李淑云;簡(jiǎn)易大鼠灌胃器的制作[J];錦州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2001年04期

5 楊明智,陳積圣;一種大鼠抓取與固定的新工具介紹[J];上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué);2001年03期

6 戴英,陸群;復(fù)方H_(505)對(duì)Wistar大鼠外周血的血液流變學(xué)指標(biāo)的影響[J];中國血液流變學(xué)雜志;2001年01期

7 韋應(yīng)波,孫喜慶,曹新生,姚永杰,馮岱雅,楊長(zhǎng)斌;+Gz暴露時(shí)間對(duì)大鼠記憶功能和行為的影響[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2003年01期

8 呂學(xué)軍,郭俊生,李敏,周利梅,張永娟;暈船大鼠體內(nèi)鐵含量的變化[J];中國職業(yè)醫(yī)學(xué);2003年04期

9 湯仁仙,王迎偉,王慧,周峰;201A中藥合劑對(duì)大鼠抗腎小球基底膜腎炎病變的影響[J];徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2003年06期

10 孫同柱,付小兵,翁立新,梁雪梅,陳偉;介紹一種簡(jiǎn)易的大鼠保定方法[J];上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué);2004年01期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 尹音;孫振宇;胡敏;李冬霞;;持續(xù)性高正加速度對(duì)大鼠顳頜關(guān)節(jié)損傷的作用[A];第八屆全國顳下頜關(guān)節(jié)病學(xué)及（牙合）學(xué)大會(huì)論文匯編[C];2011年

2 祝~=驤;iJ梊霞;洃克琴;崔素英;文允摪;，

本文編號(hào)：470176