本文關(guān)鍵詞：SIRT1抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞葡萄糖攝取和代謝，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)中葡萄糖攝取和代謝的異常增加能導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化等多種血管疾病,已有研究表明PDGF-BB通過(guò)誘導(dǎo)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)的膜轉(zhuǎn)位,促進(jìn)葡萄糖的攝取和代謝。去乙酰化酶SIRT1能影響胰腺β細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和肝細(xì)胞等葡萄糖的攝取和代謝,而在VSMCs中SIRT1與葡萄糖攝取和代謝的關(guān)系尚不清楚,本實(shí)驗(yàn)利用SIRT1的激動(dòng)劑和抑制劑分別處理VSMCs,以探討SIRT1與葡萄糖攝取及代謝的相關(guān)性。方法與結(jié)果:1 PDGF-BB刺激VSMCs的GLUT4膜轉(zhuǎn)位PDGF-BB(20 ng/m L)刺激VSMCs 0、5、15、30 min后,用Western blotting及細(xì)胞免疫熒光染色檢測(cè)GLUT4的亞細(xì)胞分布。結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,在PDGF-BB刺激的VSMCs中,GLUT4膜轉(zhuǎn)位顯著增強(qiáng),并在15 min達(dá)到高峰。2 SIRT1抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs的GLUT4膜轉(zhuǎn)位培養(yǎng)的VSMCs經(jīng)SIRT1的激動(dòng)劑白藜蘆醇(50μM)和SIRT1抑制劑EX-527(10μM)預(yù)孵育4 h后,PDGF-BB(20 ng/m L)刺激15 min。細(xì)胞免疫熒光結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,白藜蘆醇預(yù)孵育組GLUT4膜轉(zhuǎn)位減弱,而EX-527預(yù)孵育組GLUT4膜轉(zhuǎn)位增強(qiáng)。3 PDGF-BB刺激VSMCs葡萄糖攝取PDGF-BB(20 ng/m L)和熒光標(biāo)記葡萄糖類(lèi)似物2-N[7-硝基苯-2-乙二酸,34羥氨基]-2-脫氧葡萄糖(2-NBDG,100μM)共同刺激VSMCs 0、5、10、20、30、60 min,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)VSMCs對(duì)2-NBDG的攝取。結(jié)果顯示,PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs葡萄糖攝取量呈時(shí)間依賴(lài)性增強(qiáng),并在20 min時(shí)達(dá)到高峰。4 SIRT1抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs葡萄糖攝取培養(yǎng)的VSMCs經(jīng)SIRT1的激動(dòng)劑白藜蘆醇和SIRT1(50μM)抑制劑EX-527(10μM)預(yù)孵育4 h后,PDGF-BB(20 ng/m L)刺激20 min,用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)VSMCs對(duì)2-NBDG攝取。結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,白藜蘆醇預(yù)孵育組葡萄糖攝取減弱,而EX-527預(yù)孵育組葡萄糖攝取增強(qiáng)。5 PDGF-BB增強(qiáng)VSMCs己糖激酶活性PDGF-BB(20 ng/m L)刺激VSMCs 0、5、10、15、30、45、60 min后,檢測(cè)VSMCs己糖激酶活性。結(jié)果顯示,VSMCs己糖激酶活性與PDGF-BB刺激呈時(shí)間依賴(lài)性增強(qiáng),30 min達(dá)到高峰。6 SIRT1抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs己糖激酶活性增強(qiáng)培養(yǎng)的VSMCs經(jīng)SIRT1的激動(dòng)劑白藜蘆醇(50μM)和SIRT1抑制劑EX-527(10μM)預(yù)孵育4 h后,PDGF-BB(20 ng/m L)刺激30 min后檢測(cè)VSMCs己糖激酶活性,結(jié)果顯示,白藜蘆醇預(yù)孵育組己糖激酶活性減弱,而EX-527預(yù)孵育組己糖激酶活性增強(qiáng)。結(jié)論:1 PDGF-BB刺激VSMCs的GLUT4膜轉(zhuǎn)位,增加葡萄糖攝取,提高己糖激酶活性。2 SIRT1抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs的GLUT4膜轉(zhuǎn)位、葡萄糖攝取及代謝活性。
【關(guān)鍵詞】：血管平滑肌細(xì)胞 PDGF-BB SIRT1 GLUT4 己糖激酶
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-8
• 英文縮寫(xiě)8-9
• 前言9-10
• 材料與方法10-14
• 結(jié)果14-17
• 附圖17-21
• 討論21-22
• 結(jié)論22
• 參考文獻(xiàn)22-25
• 綜述 SIRT1功能的研究進(jìn)展25-43
• 參考文獻(xiàn)34-43
• 致謝43-44
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷44-45

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本文編號(hào)：423116