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化瘀滌痰湯對(duì)急性硬膜下血腫模型大鼠抗血管新生和BBB保護(hù)作用的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-05-29 19:01

  本文關(guān)鍵詞:化瘀滌痰湯對(duì)急性硬膜下血腫模型大鼠抗血管新生和BBB保護(hù)作用的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的1、通過注射自體血液致大鼠硬膜下血腫模型及其穩(wěn)定性研究,為實(shí)驗(yàn)提供最合適的動(dòng)物模型2、復(fù)制急性硬膜下血腫大鼠模型,在給予化瘀滌痰湯14天后,檢測(cè)各組大鼠腦血漿中PT、TT、FG含量,血漿中VEGF、NO、ET-1含量,化瘀滌痰湯的抗凝血作用與促血腫消散作用,以及腦組織中VEGF和b FGF的m RNA表達(dá)量,腦組織中VEGF、b FGF、HIF-1α、Claudin-5蛋白的表達(dá)量和NSE、S100B含量來探索化瘀滌痰湯對(duì)急性硬膜下血腫模型大鼠腦組織中HIF-α和Claudin-5蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)作用,探討化瘀滌痰湯的抗畸形血管新生以及對(duì)BBB的保護(hù)作用。方法1、將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組和300μl、500μl、700μl(即分別向硬模下注射300μl、500μl、700μl的自體血液)模型組。分別于術(shù)后第2、4、6、8、10、14天,每組各取6只,以腹主動(dòng)脈取血,取腦組織,并采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)方法測(cè)定各組大鼠血漿中NSE、S100B蛋白的含量。2、建立硬膜下血腫大鼠模型,以天丹通絡(luò)膠囊為陽性對(duì)照藥(0.54g/kg),觀察給予化瘀滌痰湯大、中、小劑量組(56.62g/kg,28.26g/kg,14.13g/kg)的硬膜下模型大鼠的血腫面積,末次給藥后取血漿采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)方法測(cè)定各組大鼠血漿中PT、TT、FG、NO、ET-1和VEGF的含量。3、采用RT-PCR方法來檢測(cè)模型大鼠血腫側(cè)腦組織中VEGF和b FGF的m RNA表達(dá)量,采用WB腦組織中VEGF、b FGF、HIF-1α、Claudin-5蛋白的表達(dá)量以及Elisa法檢測(cè)血清中NSE、S100B含量。結(jié)果1、不同注血?jiǎng)┝繉?duì)急性硬膜下大鼠模型穩(wěn)定性影響與假手術(shù)組比較,300μl組血液的NSE在第2、4天時(shí)顯著增加,在第6、8天時(shí)漸漸減少,說明血腫開始消散,在第10、14天時(shí)恢復(fù)到接近假手術(shù)組;500μl組和700μl組的NSE含量在第2、6、8、10、14天時(shí)都顯著升高,而在第4d時(shí)升高不明顯。300μl組血液的S100B蛋白含量在第4天時(shí)較高,在第2、6天時(shí)較低,在第8、10、14天時(shí)含量接近假手術(shù)組,說明血腫自行消散,損傷自行修復(fù);500μl組和700μl組的S100B蛋白含量一直處于較高的狀態(tài)。2、化瘀滌痰湯對(duì)硬膜下血腫模型大鼠模型抗凝血以及促血腫消散的影響HG、HZ和HD劑量組能夠減小硬膜下血腫模型大鼠血腫面積,降低血漿中TT水平,升高FG、PT水平,其中HG、HZ劑量組具有更好的效果,大鼠血漿中NO含量明顯降低,ET-1含量明顯升高,NO/ET-1比值失衡,VEGF的含量明顯上升。與模型組比較,HD劑量組、HZ劑量組、HX劑量組以及陽性組NO的含量均顯著升高;HD劑量組和陽性組的ET-1含量顯著降低,而其他劑量組雖有降低但差異不顯著,各組的NO/ET-1比值趨向假手術(shù)組,作用效果與陽性藥相似;HD劑量組VEGF的含量顯著下降,HZ劑量組的含量也明顯降低而陽性藥組的含量無明顯變化。3、化瘀滌痰湯的抗畸形血管新生以及對(duì)BBB的保護(hù)作用模型組大鼠注血側(cè)腦組織中的VEGF和b FGF m RNA的表達(dá)顯著升高蛋白含量均升高,與模型組比較,HG、HZ和HD劑量組以及TD組大鼠腦組織中VEGF和b FGF m RNA表達(dá)均明顯降低,蛋白的含量均降低。與假手術(shù)組比較,模型組大鼠注血側(cè)腦組織中HIF-1α蛋白表達(dá)量均上調(diào),Claudin-5的蛋白表達(dá)量顯著降低,模型組大鼠血清中NSE和S100B的含量均上升,與模型組比較,HG、HZ、HD組和TD組HIF-1α的表達(dá)均顯著下調(diào),HG組和TD組大鼠腦組織中Claudin-5表達(dá)均升高,HG、HZ、HD和TD組NSE、S100B含量均降低。結(jié)論1、大鼠硬膜下注射500μl自體血復(fù)制的大鼠急性硬膜下血腫模型穩(wěn)定性更好,有利于實(shí)驗(yàn)研究。2、化瘀滌痰湯能夠顯著下調(diào)VEGF和b FGF的m RNA表達(dá)以及蛋白表達(dá),從而對(duì)畸形血管的新生起到抑制作用。3、化瘀滌痰湯通過降低急性硬膜下血腫大鼠腦組織中HIF-1α蛋白表達(dá)并增加Claudin-5蛋白的表達(dá)來保護(hù)BBB。
【關(guān)鍵詞】:化瘀滌痰湯 急性硬膜下血腫 抗凝血 抗血管新生 BBB
【學(xué)位授予單位】:安徽中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R285.5;R-332
【目錄】:
  • 中文摘要7-10
  • ABSTRACT10-13
  • 英文縮略詞對(duì)照(ABBREVIATION)13-15
  • 第一部分 注血?jiǎng)┝繉?duì)急性硬膜下血腫模型穩(wěn)定性的影響15-30
  • 1 前言15-16
  • 2 實(shí)驗(yàn)材料16
  • 2.1 動(dòng)物16
  • 2.2 藥品和試劑16
  • 2.3 儀器設(shè)備16
  • 3 實(shí)驗(yàn)方法16-19
  • 3.1 動(dòng)物分組16
  • 3.2 模型建立16-17
  • 3.3 動(dòng)物處死與取材17
  • 3.4 指標(biāo)檢測(cè)17-19
  • 3.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理19
  • 4 結(jié)果19-24
  • 4.1 不同注血?jiǎng)┝扛鹘M的成活率比較19-20
  • 4.2 不同注血量所致血腫在造模過程中的消散狀況比較20-22
  • 4.3 各組模型大鼠血漿中NSE含量隨時(shí)間變化的影響22-23
  • 4.4 各組模型大鼠血漿中S100B含量隨時(shí)間變化的影響23-24
  • 5 討論24-27
  • 6 結(jié)論27
  • 第一部分參考文獻(xiàn)27-30
  • 第二部分 化瘀滌痰湯對(duì)急性硬膜下大鼠模型抗血管新生和對(duì)BBB的保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究30-62
  • 1 前言30-32
  • 2 材料32-35
  • 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物32
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑32-33
  • 2.3 主要儀器33-35
  • 3 方法35-42
  • 3.1 模型制備35
  • 3.2 動(dòng)物分組及給藥35
  • 3.3 指標(biāo)檢測(cè)35-42
  • 3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理42
  • 4 結(jié)果42-53
  • 4.1 化瘀滌痰湯對(duì)急性硬膜下血腫模型大鼠硬膜下血腫面積的影響42-43
  • 4.2 化瘀滌痰湯對(duì)硬膜下血腫模型大鼠血漿中PT、TT和FG含量的影響43-44
  • 4.3 化瘀滌痰湯對(duì)模型大鼠血漿中VEGF、NO、ET-1 和NO/ET-1 比值的影響44-45
  • 4.4 化瘀滌痰湯對(duì)模型大鼠血清中NSE和S100B含量的影響45-47
  • 4.5 化瘀滌痰湯對(duì)模型大鼠腦組織中VEGF和bFGF的mRNA含量的影響47-50
  • 4.6 化瘀滌痰湯對(duì)模型大鼠腦組織中VEGF、bFGF、HIF-1α和Claudin-5 蛋白含量的影響50-53
  • 5 討論53-56
  • 5.1 化瘀滌痰湯的抗凝血作用與促血腫消散作用53-55
  • 5.2 化瘀滌痰湯抗畸形血管新生以及對(duì)BBB的保護(hù)作用55-56
  • 6 結(jié)論56-58
  • 第二部分參考文獻(xiàn)58-62
  • 綜述62-68
  • 參考文獻(xiàn)65-68
  • 附錄68-69
  • 個(gè)人簡歷68
  • 碩士期間發(fā)表的科研論文68-69
  • 致謝69

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

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8 錢維;陳國昌;張永鎮(zhèn);朱偉;李兆申;蔡全才;;抗EGFR單抗與抗VEGF單抗聯(lián)合治療轉(zhuǎn)移性大腸癌的Meta分析[J];中國腫瘤生物治療雜志;2014年01期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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  本文關(guān)鍵詞:化瘀滌痰湯對(duì)急性硬膜下血腫模型大鼠抗血管新生和BBB保護(hù)作用的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào):405455

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