目的對(duì)本公司制備的白喉毒素?zé)o毒突變體CRM197蛋白進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證分析。方法通過(guò)發(fā)酵、提純制備3批CRM197蛋白,經(jīng)N-末端序列、C-末端序列、質(zhì)量肽圖和肽段覆蓋率分析進(jìn)行一級(jí)氨基酸序列結(jié)構(gòu)確證分析,經(jīng)圓二色譜法進(jìn)行二級(jí)蛋白結(jié)構(gòu)確證分析。結(jié)果 3批CRM197蛋白N-末端均為GADDVVDSSK,C-末端均為FEIKS,質(zhì)量肽圖的紫外圖譜高度一致,肽段覆蓋率為100%,一級(jí)結(jié)構(gòu)與標(biāo)準(zhǔn)CRM197蛋白氨基酸序列完全一致。3批CRM197蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)算值比例差異不大,批間穩(wěn)定。結(jié)論本公司自制的3批CRM197蛋白與標(biāo)準(zhǔn)CRM197蛋白結(jié)構(gòu)基本一致,為研制以CRM197為載體蛋白的多糖-蛋白結(jié)合疫苗及其產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。

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圖1CRM20170402(A）、CRM20170503(B）和CRM20170504批（C)CRM197蛋白質(zhì)量肽圖3～30min紫外圖譜標(biāo)注圖對(duì)比

圖2CRM20170402(A）、CRM20170503(B）和CRM20170504批（C)CRM197蛋白質(zhì)量肽圖30～60min紫外圖譜標(biāo)注圖對(duì)比

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