目的建立定量檢測重組蛋白中G418殘留量的超高效液相色譜(ultra performance liquid chromatography,UPLC)-蒸發(fā)光散射檢測(evaporative light scattering detection,ELSD)法,并進行驗證。方法 G418經(jīng)UPLC洗脫后,通過蒸發(fā)光散射檢測器檢測,首先將柱洗脫液霧化形成氣溶膠,然后在加熱的漂移管中將溶劑蒸發(fā),余下不揮發(fā)性溶質(zhì)顆粒在光散射檢測池中進行檢測,通過標準曲線計算質(zhì)控品中G418濃度。對建立的方法進行專屬性、重復(fù)性、中間精密度、定量限、耐用性、線性驗證。結(jié)果 G418濃度在0. 01～0. 20 mg/m L范圍內(nèi),標準曲線的線性較好,R²> 0. 99,定量限為0. 01 mg/mL;質(zhì)控品的加樣回收率在80%～120%之間;中間精密度試驗回收率的RSD為3. 44%;定量限試驗回收率的RSD為5. 38%;耐用性試驗回收率的RSD為4. 56%。結(jié)論 UPLC-ELSD法精密度良好,可用于重組蛋白研發(fā)及生產(chǎn)過程中G418殘留的監(jiān)測。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 樣品
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 溶液制備
        1.3.1 標準溶液
    1.4 檢測方法
    1.5 方法驗證
        1.5.1 專屬性
        1.5.2 重復(fù)性
        1.5.3 中間精密度
        1.5.4 定量限
        1.5.5 耐用性
            1.5.5. 1 柱溫
            1.5.5. 2 色譜柱
        1.6線性
2 結(jié)果
    2.1 專屬性
    2.2 重復(fù)性
    2.3 中間精密度
    2.4 定量限
    2.5 耐用性
        2.5.1 柱溫
        2.5.2 色譜柱
    2.6 線性
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