為探究核酸適配體技術(shù)在食源性致病菌檢測和鑒定方面的應(yīng)用,以福氏志賀菌為研究對象,采用全細(xì)胞SELEX技術(shù)篩選與其特異性結(jié)合的適配體。經(jīng)多輪正篩和反篩,共克隆得到17條序列,4條高頻適配體(F-1、F-3、F-9和F-16)對福氏志賀菌有較高的親和力,其中F-1和F-9與福氏志賀菌的親和力較高,相應(yīng)的親和常數(shù)Kd值分別為(51.3±3.25) nmol/L和(42.6±7.11) nmol/L。軟件模擬F1和F9的二級結(jié)構(gòu),其最小自由能分別為-7.39 kcal/mol和-6.98 kcal/mol。本文首次篩選出對福氏志賀菌具有較高親和特異性的適配體,為后續(xù)利用適配體進(jìn)行食源性致病菌快速檢測奠定了基礎(chǔ)。

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 適配體文庫的構(gòu)建和引物合成
    1.3 適配體篩選過程
    1.4 適配體的測序分析及二級結(jié)構(gòu)模擬
    1.5 適配體的親和特異性考察
    1.6 適配體親和常數(shù)考察
2 結(jié)果與分析
    2.1 SELEX篩選得到的適配子的克隆及序列分析
    2.2 適配子的親和特異性驗證
    2.3 適配子的親和常數(shù)及其二級結(jié)構(gòu)預(yù)測
3 討論
4 結(jié)論



本文編號：3804377