本文關鍵詞：采用六西格瑪管理方法研究動物細胞生產抗體過程產量的穩(wěn)定性，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：由于抗體藥物具有能夠治愈諸多疑難雜癥的特點而備受生物醫(yī)藥行業(yè)的矚目。目前,利用動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術生產基因工程抗體已成為抗體生產的主流,而抗體產品的穩(wěn)定性問題卻成為制約其進一步發(fā)展的技術瓶頸。針對這一問題,本研究以中國倉鼠卵巢細胞生產抗體過程為研究對象,運用六西格瑪管理中的方法,調控動物細胞的培養(yǎng)和抗體生產過程中的關鍵影響參數(shù),使抗體產量實現(xiàn)統(tǒng)計學意義上的穩(wěn)定。為生物制藥企業(yè)保證其產品穩(wěn)定性提供一定的技術支撐。研究發(fā)現(xiàn)在相同的工藝條件下,不同批次獲得的抗體產量的確有較大差異。為了確定抗體生產過程中的關鍵因素,本文以細胞株c為研究對象,運用失效模式及效應分析的方法對抗體生產過程進行風險識別和評估。首先建立專業(yè)小組,以魚骨圖的形式將過程中的影響因素全部列出,然后通過問卷調查的形式,對各項因素的嚴重性、發(fā)生率和檢測率進行評估,最后將三者乘積得到風險優(yōu)先系數(shù),獲得對抗體產量穩(wěn)定性風險較大的影響因素,風險優(yōu)先系數(shù)由高到低排列為：儀器或量具的誤差、細胞比生長速率、取樣體積、基礎培養(yǎng)基初始pH值等。由于“儀器或量具的誤差”是失效模式及效應分析篩選出的風險優(yōu)先系數(shù)最高的因素,因此本文利用六西格瑪管理中的統(tǒng)計學方法對抗體生產過程中主要儀器或量具如高效液相色譜、10 mL移液管、1 mL移液槍、血球計數(shù)板和pH計的偏倚、線性、重復性和過程能力進行測量系統(tǒng)分析。結果可知HPLC、pH計、10 mL移液管和1 mL移液槍的偏倚和線性均在可接受范圍,即準確性合格；HPLC、pH計、血球計數(shù)板的重復性,分辨力都達到過程要求,即精度符合過程要求；通過過程能力分析,得到10mL移液管和改進后的1 mL移液槍的過程能力合格。這些儀器或量具的檢測結果在改進后都符合了過程的需要。通過部分析因實驗和單因素實驗對上述其余風險較高的因素進行研究,結果發(fā)現(xiàn)種子細胞比生長速率、N-1代種子培養(yǎng)基的更換、基礎培養(yǎng)基初始pH值、取樣體積、離心接種時離心后的放置時間和初始接種細胞密度是抗體產量穩(wěn)定性較為顯著的影響因素。據(jù)此,對于細胞株c原先的生產工藝進行了補充和改進。統(tǒng)計過程分析結果表明改進后的生產工藝提高了抗體產量的穩(wěn)定性。本研究結果可為抗體生產行業(yè)提高抗體藥物產量質量,降低長期生產成本,提高生產理念等方面提供一定的借鑒。
【關鍵詞】：六西格瑪管理方法 抗體產量穩(wěn)定性 CHO細胞 失效模式及效應分析
【學位授予單位】：華東理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：Q813;R392
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-10
• 第1章 文獻綜述10-21
• 1.1 利用動物細胞培養(yǎng)技術生產抗體10-12
• 1.1.1 抗體類藥物概述10-11
• 1.1.2 動物細胞培養(yǎng)技術11-12
• 1.2 動物細胞生產抗體過程的關鍵影響因素12-13
• 1.2.1 培養(yǎng)基12
• 1.2.2 pH12
• 1.2.3 溫度12-13
• 1.2.4 滲透壓13
• 1.2.5 溶氧13
• 1.2.6 二氧化碳分壓13
• 1.3 控制過程穩(wěn)定的方法——六西格瑪管理方法13-20
• 1.3.1 六西格瑪在統(tǒng)計學上的意義14-15
• 1.3.2 失效模式及效應分析15
• 1.3.3 實驗設計15
• 1.3.4 測量系統(tǒng)分析15-17
• 1.3.5 統(tǒng)計過程控制17-20
• 1.4 本文研究內容,目的與意義20-21
• 第2章 材料和方法21-23
• 2.1 實驗材料21-22
• 2.1.1 細胞株21
• 2.1.2 培養(yǎng)基21
• 2.1.3 實驗材料及儀器21-22
• 2.2 分析方法22-23
• 2.2.1 細胞計數(shù)22
• 2.2.2 抗體濃度測試方法22
• 2.2.3 IVCC值的計算22
• 2.2.4 PCD值的計算22
• 2.2.5 偏倚的計算22
• 2.2.6 精度的計算22
• 2.2.7 過程能力指數(shù)的計算22-23
• 第3章 抗體生產工藝穩(wěn)定性檢驗23-29
• 3.1 引言23
• 3.2 實驗方案23-24
• 3.3 結果與討論24-28
• 3.3.1 細胞株a的抗體產量穩(wěn)定性試驗結果24-26
• 3.3.2 細胞株b的抗體產量穩(wěn)定性試驗結果26-27
• 3.3.3 細胞株c的抗體產量穩(wěn)定性試驗結果27-28
• 3.4 本章小結28-29
• 第4章 失效模式及效應分析29-33
• 4.1 引言29
• 4.2 實驗方案29
• 4.3 結果與討論29-32
• 4.3.1 魚骨圖29-30
• 4.3.2 FMEA風險評估——問卷調查30-32
• 4.4 本章小結32-33
• 第5章 哺乳動物細胞生產抗體過程中的測量系統(tǒng)分析33-49
• 5.1 引言33
• 5.2 實驗方案33-36
• 5.3 實驗結果36-48
• 5.3.1 HPLC的測量系統(tǒng)分析36-39
• 5.3.2 pH計的測量系統(tǒng)分析39-42
• 5.3.3 10mL移液管的測量系統(tǒng)分析42-44
• 5.3.4 1mL移液槍的測量系統(tǒng)分析44-46
• 5.3.5 血球計數(shù)板的測量系統(tǒng)分析46-48
• 5.4 本章小結48-49
• 第6章 抗體產量穩(wěn)定性研究49-62
• 6.1 引言49
• 6.2 實驗方案49-50
• 6.3 結果與討論50-60
• 6.3.1 細胞株C的批式及傳代培養(yǎng)50-51
• 6.3.2 細胞株C的Plackett-Burman實驗設計51-55
• 6.3.3 細胞株C的單因素實驗設計55-58
• 6.3.4 生產工藝的改進和新工藝的穩(wěn)定性驗證58-60
• 6.4 本章小結60-62
• 第7章 全文總結及展望62-64
• 7.1 全文總結62
• 7.2 展望62-64
• 參考文獻64-67
• 致謝67

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 白寶光,張世英;基于6sigma目標的質量管理特征及其有效實施[J];內蒙古工業(yè)大學學報(自然科學版);2004年03期

2 田學民;曹玉蘋;;統(tǒng)計過程控制的研究現(xiàn)狀及展望[J];中國石油大學學報(自然科學版);2008年05期

  本文關鍵詞：采用六西格瑪管理方法研究動物細胞生產抗體過程產量的穩(wěn)定性，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：374611