人胚胎干細胞分化為自我更新的神經(jīng)中胚層祖細胞研究
發(fā)布時間:2022-10-08 21:35
人胚胎干細胞(human embryonic stem cells,hESCs)在體外可以維持穩(wěn)定自我更新,是能夠分化產(chǎn)生所有類型成體細胞的多能干細胞(pluripotent stem cells,PSCs)。通過體外定向分化產(chǎn)生各種不同類型的細胞,可為細胞替代治療提供潛在的細胞來源,在再生醫(yī)學(xué)應(yīng)用方面擁有巨大的發(fā)展前景。脊髓作為中樞神經(jīng)系,具有上下傳導(dǎo)神經(jīng)信號、神經(jīng)信號整合、協(xié)調(diào)運動等多種功能。肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化、神經(jīng)性肌肉萎縮等脊髓退行性病變以及外源性創(chuàng)傷都將導(dǎo)致脊柱損傷,目前的手術(shù)、藥物治療方式對脊髓損傷的治療效果有限,細胞移植有望成為脊髓損傷治療的新手段。神經(jīng)中胚層祖細胞(neuromesodermal progenitors,NMPs)不僅可以分化為脊髓中的神經(jīng)細胞,而且還可以產(chǎn)生脊髓周邊的中胚層組織,在脊髓損傷的細胞治療中具有獨特的應(yīng)用價值。目前已經(jīng)建立了較為成熟的誘導(dǎo)手段,將人PSCs分化為SOX2和T陽性的NMPs,但是如何實現(xiàn)NMPs的自我更新仍是有待解決的問題。本論文遵循體內(nèi)發(fā)育線索,通過使用雙重Smad抑制,同時激活WNT和FGF信號通路,成功獲得了可以穩(wěn)定自我...
【文章頁數(shù)】:111 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
abstract
縮略詞對照表
前言
實驗材料
一、主要儀器和設(shè)備
二、主要試劑及配置
三、細胞系、菌株、表達載體、實驗動物
實驗方法
一、細胞培養(yǎng)和分化
二、免疫熒光染色和特殊細胞化學(xué)染色
三、分子生物學(xué)實驗
四、動物實驗
五、統(tǒng)計方法
實驗結(jié)果
一、人胚胎干細胞的復(fù)蘇、培養(yǎng)及多能性鑒定
二、SRNMPS的誘導(dǎo)及鑒定
三、SRNMPS分化潛能驗證
四、SRNMPS的神經(jīng)定向分化實驗
五、NMPS產(chǎn)生機制的探討
討論
參考文獻
綜述
參考文獻
在讀期間發(fā)表論文和參加科研工作情況說明
致謝
本文編號:3688472
【文章頁數(shù)】:111 頁
【學(xué)位級別】:博士
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摘要
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縮略詞對照表
前言
實驗材料
一、主要儀器和設(shè)備
二、主要試劑及配置
三、細胞系、菌株、表達載體、實驗動物
實驗方法
一、細胞培養(yǎng)和分化
二、免疫熒光染色和特殊細胞化學(xué)染色
三、分子生物學(xué)實驗
四、動物實驗
五、統(tǒng)計方法
實驗結(jié)果
一、人胚胎干細胞的復(fù)蘇、培養(yǎng)及多能性鑒定
二、SRNMPS的誘導(dǎo)及鑒定
三、SRNMPS分化潛能驗證
四、SRNMPS的神經(jīng)定向分化實驗
五、NMPS產(chǎn)生機制的探討
討論
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綜述
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