為了研究抗iLRP （Immature laminin receptor protein）單克隆抗體在免疫治療中的應(yīng)用,本研究采用重組iLRP對(duì)6～8周齡BALB/c雌性小鼠進(jìn)行免疫,取免疫后小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞系SP2/0進(jìn)行細(xì)胞融合,在HAT （Hypoxanthine aminopterin thymidine）半固體培養(yǎng)基上挑選分離明顯的細(xì)胞克隆于96孔板培養(yǎng)后,取上清液通過ELISA法進(jìn)行克隆篩選,初次篩選得到23株陽性克隆,復(fù)篩后得到13株穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞株。抗體類別鑒定顯示,其中9株為IgM,3株為Ig G1,1株為IgG2a,輕鏈類型都為κ型。其中1株IgG1和IgG2a用于制備小鼠腹水,經(jīng)Protein-G柱純化,SDS-PAGE檢測(cè)抗體純度,Western blotting驗(yàn)證抗體特異性。結(jié)果表明,抗體純度均大于90%,并與i LRP有明顯的特異性結(jié)合。此結(jié)果為后續(xù)的深入研究提供了一套完整有效的抗iLRP單克隆抗體生產(chǎn)和鑒定的程序,對(duì)以iLRP為治療靶點(diǎn)的單克隆藥物研究以及最近興起的CAR-T （Chimeric antigen receptor modifie... 

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 結(jié)果與分析
    1.1 雜交瘤細(xì)胞株的獲得
    1.2 抗體亞類鑒定
    1.3 抗體的純度分析和滴度測(cè)定
    1.4 抗體特異性分析
2 討論
3 材料與方法
    3.1 主要材料與試劑
    3.2 小鼠免疫
    3.3 雜交瘤細(xì)胞株的建立
    3.4 抗體亞類鑒定
    3.5 小鼠腹水的制備和抗體純化
    3.6 純化抗體的滴度測(cè)定
    3.7 抗體特異性分析



本文編號(hào)：3656098