目的分析巴西日圓線蟲蟲體蛋白體外誘導人單核細胞白血病THP-1細胞來源巨噬細胞的極化方向,探索機體對巴西日圓線蟲感染的免疫應答機制。方法建立并維持巴西日圓線蟲培養(yǎng)的實驗室循環(huán),無菌條件下收集L3和L5蟲體,分別制備蟲體蛋白;建立THP-1細胞體外培養(yǎng)體系,經(jīng)500 ng/mL佛波酯（PMA）刺激培養(yǎng)后呈貼壁狀態(tài)的MO型細胞分別采用500 ng/mL脂多糖（LPS）+100 ng/mLγ-干擾素（IFN-γ）、白細胞介素4（IL-4）+IL-13（濃度均為100 ng/mL）、L3及L5蟲體蛋白（濃度均為5 mg/mL）進行刺激,同時設不加任何刺激的陰性對照組。通過顯微鏡鏡檢觀察刺激后細胞形態(tài)、實時熒光定量PCR（qPCR）檢測M1/M2型巨噬細胞特異性基因mRNA表達水平、流式細胞術檢測巨噬細胞表面標志物及酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測M1/M2型巨噬細胞分泌的細胞因子含量,觀察巴西日圓線蟲蟲體蛋白體外誘導THP-1來源巨噬細胞的極化方向。結果 THP-1細胞經(jīng)PMA刺激培養(yǎng)呈貼壁的MO型細胞后,經(jīng)LPS+IFN-γ刺激培養(yǎng)后呈特征性M1型極化;經(jīng)IL-4+IL-13刺激培養(yǎng)后呈特... 

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【參考文獻】：
期刊論文
[1]旋毛蟲成蟲排泄-分泌蛋白對卵清蛋白誘導的小鼠變應性鼻炎的保護作用[J]. 袁圓,王黎源,梅娟,程洋,王偉,褚亮,唐潔,李楠,李徽徽,賀文欣,楊浪浪,陳杰,白永生,吳玥,梁金寶,孫思穎,張祥,楊小迪.  中國血吸蟲病防治雜志. 2019(05)



本文編號：3655330