目的觀察高鹽對乳鼠心臟成纖維細(xì)胞（CFs）增殖及膠原分泌的影響,并分析其可能的相關(guān)機制。方法胰酶、Ⅱ型膠原酶兩步消化法消化分離乳鼠心肌組織,通過差速貼壁法收集、培養(yǎng)乳鼠CFs。CFs傳至第4代去血清同步化24 h,分為對照組（培養(yǎng)基Na⁺終濃度139 mmol/L）、高鹽組（培養(yǎng)基Na⁺終濃度146、149、152、155、158、161、164、167、170、173和176 mmol/L）,培養(yǎng)24、48、72和96 h后,CCK-8檢測CFs增殖情況。選擇增殖作用最為明顯的Na⁺濃度和作用時間,以Na⁺ 139 mmol/L為對照進(jìn)行后續(xù)實驗,高鹽組（培養(yǎng)基Na⁺終濃度161 mmol/L）,甘露醇組（甘露醇濃度為29.334 mg/ml）,其中甘露醇組與高鹽組滲透壓相同。CCK-8檢測滲透壓對CFs增殖的影響。酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測CFs培養(yǎng)上清液中Ⅰ型和Ⅲ型膠原的表達(dá)。Western印跡檢測CFs中轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）-β1、p-smad3及smad7蛋... 

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 實驗動物倫理
    1.3 乳鼠CFs的培養(yǎng)及鑒定
    1.4 CCK-8測高鹽對乳鼠CFs增殖的影響并篩選促CFs增殖的最佳Na+濃度和作用時間
    1.5 CCK-8增殖試劑盒檢測滲透壓對乳鼠CFs增殖的影響
    1.6 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測高鹽對乳鼠CFs中Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原表達(dá)的影響
    1.7 Western印跡檢測高鹽對乳鼠CFs中TGF-β1、p-smad3、smad7蛋白表達(dá)的影響
    1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié) 果
    2.1 乳鼠CFs的生長形態(tài)及鑒定
    2.2 高鹽誘導(dǎo)乳鼠CFs增殖的時效量效關(guān)系及促CFs增殖的最佳Na+濃度和作用時間
    2.3 滲透壓對乳鼠CFs增殖的影響
    2.4 高鹽對大鼠CFs Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原分泌的影響
    2.5 高鹽對大鼠CFs 中TGF-β1、p-smad3、smad7蛋白表達(dá)的影響
3 討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]高鹽誘導(dǎo)Wistar大鼠腎損害的機制及替米沙坦的干預(yù)效果[J]. 王曉春,商黔惠,石耿輝.  中國老年學(xué)雜志. 2015(12)
[2]乳鼠心肌細(xì)胞和心肌成纖維細(xì)胞體外分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化[J]. 朱曉麗,王麗,馬依彤,楊毅寧,陳邦黨,馬苗苗.  中國動脈硬化雜志. 2015(01)
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[4]轉(zhuǎn)化生長因子β1/Smads表達(dá)在高鹽飲食致Wistar大鼠心肌纖維化中的作用及替米沙坦干預(yù)[J]. 李同,商黔惠,劉嬋,石耿輝.  中華高血壓雜志. 2013(07)
[5]長期高鹽飲食對Wistar大鼠血壓和腎臟的影響及替米沙坦干預(yù)研究[J]. 王曉春,商黔惠,祝榮文,吳芹.  中華高血壓雜志. 2013(03)
[6]TGF-β1/Smads和ERK表達(dá)異常在高鹽飲食誘導(dǎo)的大鼠血管重構(gòu)中的作用[J]. 劉嬋,商黔惠,閔曉強,陳劍玲,毛萬姮.  中國病理生理雜志. 2012(10)
[7]TGF-β/Smads信號通路在心肌纖維化發(fā)生和治療中應(yīng)用前景的研究進(jìn)展[J]. 陳蓉,謝梅林.  中國藥理學(xué)通報. 2012(09)



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