生殖支原體（Mycoplasma genitalium,Mg）是介于病毒與細菌之間、缺乏細胞壁、呈高度多型性,可在無生命培養(yǎng)基中繁殖的原核細胞型微生物,可引起泌尿生殖系統(tǒng)感染,被歸類于性傳播疾病病原體之一。近年來,Mg感染率呈現(xiàn)上升趨勢,但目前仍然沒有滿足臨床需要的藥物和疫苗可供使用。Mg最關鍵的外膜粘附蛋白為生殖支原體粘附素蛋白（Mg Pa）,其C端具有較強的免疫原性,自發(fā)性的無細胞黏附活性的Mg突變株則缺乏Mg Pa,因此,Mg Pa在Mg的致病性方面起著至關重要的作用。本研究利用構建好的原核表達載體PET-30a（+）/Mg Pa在大腸桿菌中誘導表達Mg Pa的重組蛋白（r Mg Pa）,采用噬菌體展示隨機肽庫技術篩選Mg Pa重組蛋白的特異性結合多肽,并對篩選到的特異性多肽進行鑒定。本研究目的:1、利用課題組前期構建好的含生殖支原體粘附素蛋白（Mg Pa）優(yōu)勢表位（1 075¹ 364 aa）的重組載體,表達并純化Mg Pa,為研究Mg Pa的生物學功能奠定前期實驗基礎。2、利用噬菌體展示隨機肽庫篩選并鑒定Mg Pa的特異性結合多肽,為研究Mg Pa的致病... 

【文章來源】：南華大學湖南省

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

IPTG不同誘導濃度對pET-30a(+)/MgPa表達的影響

同一 IPTG 誘導劑量 1.5mmol/L，不同誘進行條件摸索，進行 SDS-PAGE 分析（圖 2.2）顯示：表達量增多，而蛋白量達到高峰的誘導時間為 4h 時。M 1 2 3 4 5 6 7 8

圖 2.3 誘導溫度的不同對 pET-30a(+)/MgPa 表達的影響準品；1：37℃誘導 pET-30a(+)/MgPa 的沉淀；2：37℃誘導 pET-30a(+：30℃誘導 pET-30a(+)/MgPa 的沉淀；4：30℃誘導 pET-30a(+)/MgPa 的導 pET-30a(+)/MgPa 的沉淀；6：27℃誘導 pET-30a(+)/MgPa 的上清。

【參考文獻】：
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本文編號：3564236