本文關(guān)鍵詞：外周血造血干細(xì)胞微泡的提取鑒定及初探其生物學(xué)特性，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的：外周血造血干細(xì)胞是存在于外周血中的一類(lèi)具有高度自我更新和分化潛能的造血細(xì)胞群體。正常生理?xiàng)l件下外周血中造血干細(xì)胞的含量約占骨髓中的0.1%-1%,當(dāng)給予動(dòng)員劑刺激后,外周血中的造血干細(xì)胞含量增加,CD34+細(xì)胞占外周血單個(gè)核細(xì)胞(MNC)的0.5%-1.5%。隨著外周血造血干細(xì)胞采集簡(jiǎn)便、短期內(nèi)采集,另外輸注給受者后造血功能和免疫功能重建快及植入率高,逐漸取代骨髓造血干細(xì)胞用于臨床。外周血造血干細(xì)胞具有促進(jìn)造血、免疫功能重建、抗腫瘤等作用。研究已證實(shí)胚胎干細(xì)胞、臍帶血造血干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞可分泌微泡,而且分泌的微泡攜帶母細(xì)胞的成分及特性,另外分泌的微泡沒(méi)有了母體細(xì)胞的一些缺點(diǎn)。對(duì)于外周血造血干細(xì)胞能否分泌微泡,目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)報(bào)道。本研究旨在探討外周血造血干細(xì)胞能否分泌微泡,如果外周血造血干細(xì)胞能分泌微泡,初步探討外周血造血干細(xì)胞微泡的生物學(xué)特性。研究?jī)?nèi)容：1.驗(yàn)證外周血造血干細(xì)胞能否分泌微泡；2.如果能,開(kāi)始驗(yàn)證它們的生物學(xué)功能。研究方法：1.使用超速離心法提取孵育后外周血造血干細(xì)胞培養(yǎng)上清中的“物質(zhì)”,并應(yīng)用負(fù)染透射電鏡從形態(tài)上鑒別提取的物質(zhì)是否為微泡；2.如果驗(yàn)證外周血造血干細(xì)胞能分泌微泡,應(yīng)用細(xì)胞膜染液PKH-26標(biāo)染微泡和細(xì)胞核染液Hoechst 33258標(biāo)染PBMNC細(xì)胞核,再通過(guò)激光掃描共聚焦顯微鏡觀察微泡能否進(jìn)入PBMNC中；3.如果能進(jìn)入,驗(yàn)證微泡能否改變受體細(xì)胞PBMNC的殺傷效應(yīng)。研究結(jié)果：1.外周血造血干細(xì)胞采能分泌微泡；2.外周血造血干細(xì)胞微泡能進(jìn)入PBMNC細(xì)胞中；3.初步驗(yàn)證了微泡能改變受體細(xì)胞PBMNC的殺傷效應(yīng)。研究結(jié)論：1.首次證實(shí)了外周血造血干細(xì)胞可以分泌微泡；2.初步驗(yàn)證了外周血造血干細(xì)胞微泡可以改變受者細(xì)胞的生物學(xué)功能。
【關(guān)鍵詞】：外周血造血干細(xì)胞 微泡
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-9
• 前言9-10
• 第一章 微泡的提取與鑒定10-23
• 第一節(jié) K562細(xì)胞培養(yǎng)上清微泡的提取和鑒定10-13
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料10-11
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法11-12
• 3. 結(jié)果12-13
• 第二節(jié) 胎牛血清微泡的提取與鑒定13-15
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料14
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法14-15
• 3. 結(jié)果15
• 第三節(jié) 外周造血干細(xì)胞微泡的提取和鑒定15-19
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料15-16
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法16-17
• 3. 結(jié)果17-19
• 第四節(jié) 外周血造血干細(xì)胞微泡的蛋白定量19-20
• 1 實(shí)驗(yàn)材料19
• 2 實(shí)驗(yàn)方法19-20
• 3 結(jié)果20
• 第五節(jié) 外周血造血干細(xì)胞微泡表面抗原的流式鑒定20-23
• 1 實(shí)驗(yàn)材料20-21
• 2 實(shí)驗(yàn)方法21-22
• 3 結(jié)果22-23
• 第二章 初探外周血造血干細(xì)胞微泡的生物學(xué)功能23-34
• 第一節(jié) 人外周血造血干細(xì)胞微泡進(jìn)入正常受者外周血單個(gè)核細(xì)胞中23-27
• 1 實(shí)驗(yàn)材料23-24
• 2 實(shí)驗(yàn)方法24-26
• 3 結(jié)果26-27
• 第二節(jié) 外周血造血干細(xì)胞微泡進(jìn)入緩解期白血病患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中27-30
• 1 實(shí)驗(yàn)材料28
• 2 實(shí)驗(yàn)方法28-29
• 3 結(jié)果29-30
• 第三節(jié) 在體外初步探討外周血造血干細(xì)胞微泡的特性30-34
• 1 實(shí)驗(yàn)材料31
• 2 實(shí)驗(yàn)方法31-33
• 3 結(jié)果33-34
• 第三章 動(dòng)員后小鼠脾造血干細(xì)胞微泡進(jìn)入受鼠脾單個(gè)核細(xì)胞中34-38
• 1 實(shí)驗(yàn)材料35-36
• 2 實(shí)驗(yàn)方法36-37
• 3 結(jié)果37-38
• 討論38-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 附錄 個(gè)人簡(jiǎn)歷44-45
• 致謝45-46
• 綜述46-53
• 參考文獻(xiàn)51-53

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 左洪莉;彭恩蘭;劉鐵強(qiáng);黃珊;李玉芳;姚曉蘭;尚世臣;艾輝勝;;CB6F1小鼠急性粒單核細(xì)胞白血病M4(AML-M4)模型的建立及鑒定[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2011年01期

2 吳惠惠;劉鐵強(qiáng);孫雪冬;黃曉梅;張銳;劉志強(qiáng);滿(mǎn)秋紅;黃雅靜;孫琪云;左紅莉;喬建輝;余長(zhǎng)林;胡鍇勛;艾輝勝;郭梅;;白血病小鼠H-2全不相合微移植模型的建立及鑒定[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2014年03期

  本文關(guān)鍵詞：外周血造血干細(xì)胞微泡的提取鑒定及初探其生物學(xué)特性，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：352439