發(fā)布時(shí)間：2021-11-11 18:35

　　目的基于重組酶介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（Recombinase-aided isothermal amplification assay,RAA）建立一種快速檢測(cè)多房棘球絳蟲的核酸檢測(cè)方法,并進(jìn)行檢測(cè)效果評(píng)價(jià)。方法以多房棘球絳蟲線粒體基因序列（GenBank登錄號(hào):AB018440）作為靶序列,根據(jù)RAA反應(yīng)原理設(shè)計(jì)并合成引物,利用該引物進(jìn)行RAA擴(kuò)增。以聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）作為平行對(duì)照,應(yīng)用RAA方法擴(kuò)增不同稀釋濃度的多房棘球絳蟲基因組DNA及梯度稀釋的含不同拷貝數(shù)目的基因片段的pMD19-T（Simple）克隆質(zhì)粒,以評(píng)價(jià)RAA檢測(cè)的敏感性。應(yīng)用此方法檢測(cè)細(xì)粒棘球絳蟲（G1型）、牛帶絳蟲、亞洲帶絳蟲、多頭帶絳蟲、犬復(fù)孔絳蟲、犬弓首蛔蟲、毛首鞭形線蟲、藍(lán)氏賈第蟲、肝片吸蟲、衛(wèi)氏并殖吸蟲、大片吸蟲以及華支睪吸蟲基因組DNA,以評(píng)價(jià)其特異性。在對(duì)建立的方法進(jìn)行條件優(yōu)化后,檢測(cè)9份感染多房棘球蚴的動(dòng)物組織樣本、3份模擬現(xiàn)場(chǎng)多房棘球蚴感染陽(yáng)性犬糞樣本以及2份現(xiàn)場(chǎng)陽(yáng)性犬糞樣本,以驗(yàn)證所建立的RAA方法的可靠性和實(shí)用性。結(jié)果所建立的RAA法可在40 min內(nèi)特異性擴(kuò)增多房棘球絳蟲目的基因片段。以多房... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)血吸蟲病防治雜志. 2020,32(02)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

多房棘球蚴包囊基因組DNA擴(kuò)增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果

不同RAA反應(yīng)時(shí)間擴(kuò)增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果

以多房棘球絳蟲基因組DNA為模板的RAA法檢測(cè)敏感性

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]重組酶介導(dǎo)的華支睪吸蟲特異性核酸等溫?cái)U(kuò)增方法的建立及初步評(píng)價(jià)[J]. 張強(qiáng),丁昕,吳小珉,劉燕紅,劉劍峰,徐祥珍,應(yīng)清界,曹俊,戴洋.  中國(guó)血吸蟲病防治雜志. 2019(05)
[2]重組酶介導(dǎo)的隱孢子蟲屬特異性等溫核酸擴(kuò)增方法的建立及評(píng)價(jià)[J]. 倪碧嫻,吳小珉,劉燕紅,徐祥珍,應(yīng)清界,曹俊,戴洋.  中國(guó)血吸蟲病防治雜志. 2019(04)
[3]A multiplex PCR for differential detection ofsensu stricto,andin China[J]. Shang Jing-Ye;Zhang Guang-Jia;Liao Sha;Huang Yan;Yu Wen-Jie;He Wei;Yang Guang-You;Li Tiao-Ying;Chen Xing-Wang;Zhong Bo;Wang Qian;Wang Qi;Li Rui-Rui;Wang Hao;Institute of Parasitic Diseases, Sichuan Center for Disease Control and Prevention, Chengdu, Sichuan, People’s Republic of China;Department of Parasitology, College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Chengdu, Sichuan, People’s Republic of China;.  貧困所致傳染�。ㄓ⑽模�. 2019(04)
[4]重組酶介導(dǎo)的核酸等溫?cái)U(kuò)增熒光法快速檢測(cè)日本血吸蟲感染性釘螺[J]. 李婷,劉燕紅,趙松,熊春蓉,董萱,張鍵鋒,李偉,應(yīng)清界,楊坤.  中國(guó)血吸蟲病防治雜志. 2019(02)
[5]沙門菌熒光重組酶介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)方法的應(yīng)用研究[J]. 周冬根,羅潔.  中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué). 2019(02)
[6]重組酶介導(dǎo)的日本血吸蟲特異性基因片段核酸等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)方法的建立[J]. 趙松,李婷,楊坤,李偉,張鍵鋒,郭利川,劉燕紅,戴洋,應(yīng)清界,羊海濤.  中國(guó)血吸蟲病防治雜志. 2018(03)
[7]2008-2016年我國(guó)棘球蚴病死亡病例流行病學(xué)特征分析[J]. 田添,曹淳力,伍衛(wèi)平,賈鐵武,錢門寶,郝瑜婉,朱澤林,王強(qiáng),李石柱,周曉農(nóng).  中國(guó)血吸蟲病防治雜志. 2018(03)
[8]等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)在寄生蟲及其他病原體檢測(cè)中的應(yīng)用[J]. 李婷,楊坤.  中國(guó)血吸蟲病防治雜志. 2018(02)
[9]我國(guó)兩型包蟲病的流行與分布情況[J]. 伍衛(wèi)平.  中國(guó)動(dòng)物保健. 2017(07)
[10]青藏高原地區(qū)犬棘球絳蟲感染的流行病學(xué)特征[J]. 劉輝,肖寧,楊詩(shī)杰,王東,彭佳.  中國(guó)血吸蟲病防治雜志. 2017(02)



本文編號(hào)：3489319