發(fā)布時間：2021-10-24 15:25

　　該研究以Zmpste24基因缺陷早衰小鼠胚胎成纖維細胞（MEF）為模型,探索細胞核內(nèi)亞結構PML NBs（promyelocytic leukemia nuclear bodies）與細胞衰老之間的關聯(lián)。在Zmpste24野生型（+/+）和缺陷型（-/-） MEF細胞中過表達GFP-PML1和GFP-PML2及對照GFP,通過傳代計數(shù)監(jiān)測細胞增殖,β-gal染色檢測細胞衰老,免疫熒光觀察PML NBs結構形態(tài)、增殖標志物Ki-67和DNA損傷應答信號γH2AX。結果顯示,過表達PML2而非PML1顯著抑制Zmpste24^+/+和Zmpste24^-/- MEF細胞的增殖,降低Ki-67陽性細胞比例,削弱DNA損傷修復能力,加速細胞衰老。而且,過表達PML2促進Zmpste24^-/- MEF細胞衰老的效應比在Zmpste24^+/+細胞中更為顯著。此外,對比Zmpste24^+/+,在Zmpste24^-/- MEF細胞中過表達PML2可誘導更高比例的細胞產(chǎn)生線性P... 

【文章來源】：中國細胞生物學學報. 2020,42(06)CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

過表達PML2誘導產(chǎn)生線性PML NBs結構

2.5 線性PML NBs促進Zmpste24?/? MEF細胞衰老為進一步弄清PML2介導的線性PML NBs結構在細胞衰老中的作用,我們將過表達GFP-PML2的Zmpste24?/? MEF細胞中攜帶正常與異常NBs結構的細胞,進行對比分析。結果發(fā)現(xiàn),對比正常PML NBs結構的細胞,線性NBs結構的細胞中Ki-67陽性的比例顯著減少(圖5A),β-gal染色陽性比例顯著增多(圖5B),本底γH2AX foci數(shù)目(圖5C)以及X射線輻射損傷后未修復的γH2AX foci數(shù)目(圖5D)都明顯增多。結果表明,PML2介導形成的異常線性結構可抑制Zmpste24?/? MEF細胞增殖,干擾其DNA修復能力,促進細胞衰老。

本研究以Zmpste24基因缺陷早衰小鼠MEF細胞為模型,初步揭示了PML2介導的線性NBs干擾DNA修復,促進細胞衰老,這為探討PML NBs異常結構在HGPS早衰癥中的作用及相關分子機制提供了實驗及理論基礎。


本文編號：3455517