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真核表達載體介導(dǎo)的ICOSIg基因在大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞中表達的實驗研究

發(fā)布時間:2021-08-29 14:53
  目的構(gòu)建含可誘導(dǎo)共刺激分子(ICOS)融合蛋白(ICOSIg)基因的真核表達載體,探討其能否在大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞(ADSCs)中表達。方法克隆編碼大鼠ICOS的胞外片段,將其與編碼人免疫球蛋白Ig G Fc段的基因融合,構(gòu)建ICOSIg融合基因及其分泌型真核表達載體pc DNA3.1(+)/ICOSIg。經(jīng)測序鑒定后轉(zhuǎn)染ADSCs,Western blot法檢測ICOSIg在ADSCs中的表達。結(jié)果經(jīng)測序鑒定驗證pc DNA3.1(+)/ICOSIg質(zhì)粒構(gòu)建成功,且能在ADSCs中成功表達。結(jié)論 ICOSIg在ADSCs中成功表達,為進一步研究免疫耐受機制提供了實驗基礎(chǔ)。 

【文章來源】:天津醫(yī)藥. 2020,48(08)北大核心

【文章頁數(shù)】:4 頁

【部分圖文】:

真核表達載體介導(dǎo)的ICOSIg基因在大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞中表達的實驗研究


ADSCs誘導(dǎo)分化為成脂細胞、成骨細胞及成胰島樣細胞(×200)

融合蛋白,細胞,測序,質(zhì)粒


pcDNA3.1(+)/ICOSIg重組質(zhì);驕y序圖

序列,質(zhì)粒,移碼突變,缺失


選擇酶切鑒定正確的重組質(zhì)粒,將其中的插入片段經(jīng)測序鑒定,與GenBank上公布的目標序列完全一致,無插入、缺失和移碼突變,表明質(zhì)粒構(gòu)建正確,見圖2。2.3大鼠ADSCs的體外培養(yǎng)和鑒定


本文編號:3370858

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