目的:探討配對盒基因2（paired box 2,Pax2）對小鼠胚胎間充質(zhì)干細胞增殖及成骨向分化能力的影響。方法:本實驗采用小鼠胚胎間充質(zhì)干細胞系C3H/10T1/2及原代培養(yǎng)的小鼠骨皮質(zhì)來源間充質(zhì)干細胞（mouse compact bone-derived mouse MSCs,mMSCs）,對細胞行體外成骨誘導后,采用蛋白質(zhì)印跡法（Western Blotting,WB）及細胞免疫熒光檢測Pax2在成骨誘導過程中的原始表達,免疫組化檢測C57BL/6小鼠胚胎期17.5天（E17.5）及出生后21天（P21）脛骨切片Pax2的表達。重組慢病毒轉(zhuǎn)染C3H/10T1/2及mMSCs敲低Pax2,CCK-8法、流式細胞術(shù)檢測Pax2對細胞增殖、周期及凋亡的影響;實時定量PCR、WB檢測成骨相關(guān)基因表達;堿性磷酸酶（ALP）及茜素紅（ARS）染色檢測礦化影響。生物信息學（Genomatix數(shù)據(jù)庫）預測Pax2在Runx2啟動子區(qū)域的結(jié)合位點,熒光素酶報告基因檢測Runx2的轉(zhuǎn)錄活性。WB及細胞免疫熒光進一步檢測MAPK信號通路相關(guān)基因（ERK,JNK,p38）磷酸化表達水平。利用BALB/... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

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Pax2在C3H/10T1/2細胞和mMSCs成骨向分化中胞內(nèi)表達逐漸增高（標尺：50μm）

Pax2在小鼠脛骨成骨細胞中的表達（標尺：50μm）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]組織工程修復區(qū)早期牙移動壓力側(cè)牙周組織的改建[J]. 李一涵,張飛飛,包世婕,魏斌,宮耀.  上�？谇会t(yī)學. 2018(05)



本文編號：3355815