目的新型鼠疫疫苗包含鼠疫減毒菌EV株培養(yǎng)提取的天然F1抗原。研究生理氯化鈉溶液中F1抗原的生物與理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)概況及聚合狀態(tài)等特性,以期對(duì)F1抗原的制備、質(zhì)量控制及其免疫原性研究提供理論依據(jù)。方法①過(guò)碘酸-希夫（PAS）染色法、糖蛋白碳水化合物估測(cè)試劑盒鑒定F1抗原是否為糖蛋白,蒽酮-硫酸法定量測(cè)定F1抗原中多糖含量,基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF-MS）技術(shù)測(cè)定F1抗原單體相對(duì)分子質(zhì)量并與理論值差異比對(duì),間接證明F1抗原是否糖基化;②高效分子排阻色譜法聯(lián)用多角度激光散射（HPSEC-MALLS）法研究保存于生理氯化鈉溶液中F1抗原的天然聚集狀態(tài);③搜索GeneBank獲得鼠疫菌F1抗原的核苷酸序列,經(jīng)DNAStar軟件翻譯出氨基酸序列,并通過(guò)肽段覆蓋率驗(yàn)證成熟F1抗原的氨基酸序列,以圓二色譜試驗(yàn)結(jié)合K2D2軟件推測(cè)二級(jí)結(jié)構(gòu),MALDI-TOF-MS測(cè)定單體相對(duì)分子質(zhì)量。結(jié)果①鑒定出F1抗原單體相對(duì)分子質(zhì)量為15 500的蛋白質(zhì),不含有多糖成分;②F1抗原的相對(duì)分子質(zhì)量分布范圍在10⁶～10⁷之間,呈現(xiàn)聚集狀態(tài);③F1抗... 

【文章來(lái)源】：微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展. 2020,48(03)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

染色法鑒定糖蛋白

MALDI-TOF-MS測(cè)定F1抗原的單體相對(duì)分子質(zhì)量為15 562,與理論值15 563相一致。即F1抗原為不含多糖成分的蛋白質(zhì),見(jiàn)圖2。2.2 F1抗原的天然狀態(tài)研究

結(jié)果顯示, F1抗原從外水體積處開(kāi)始出峰,并持續(xù)進(jìn)入到內(nèi)水體積,峰型類似于拖尾,表明F1抗原以較大相對(duì)分子質(zhì)量存在,并呈現(xiàn)不均一的形態(tài),見(jiàn)圖3。2.2.2 F1抗原的HPSEC-MALLS分析

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]我國(guó)鼠疫流行形勢(shì)分析及其防治策略探討[J]. 趙秋芳,尹家祥.  中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué). 2016(07)
[2]鼠疫耶爾森菌F1抗原的性質(zhì)研究[J]. 王婷,王秉翔.  微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展. 2012(02)
[3]角度激光光散射儀和體積排阻色譜法聯(lián)用檢測(cè)雙黃連注射液中的高分子物質(zhì)[J]. 吳春麗,李攀,馬慧艷,李愛(ài)星,喬家彬,任常忠.  藥物分析雜志. 2011(10)



本文編號(hào)：3350542