目的:發(fā)育過程中的干細(xì)胞數(shù)目調(diào)控與組織穩(wěn)態(tài)平衡、癌癥、衰老等重大問題密切相關(guān)。果蠅腸道600個(gè)干細(xì)胞在蛹期先不對(duì)稱分裂,后各自對(duì)稱分裂,產(chǎn)生一對(duì)干細(xì)胞與一對(duì)內(nèi)分泌細(xì)胞,出蛹前達(dá)到1200個(gè)干細(xì)胞。干細(xì)胞不對(duì)稱分裂時(shí),細(xì)胞極性蛋白Miranda（Mira）通過物理結(jié)合將內(nèi)分泌細(xì)胞分化因子Prospero（Pros）定位到底部子代細(xì)胞中;而內(nèi)分泌前體細(xì)胞對(duì)稱分裂時(shí),Mira消失,Pros平均分配到兩個(gè)子代細(xì)胞。Mira決定細(xì)胞的分裂方式及其子代細(xì)胞的命運(yùn),因此Mira是決定干細(xì)胞數(shù)目的關(guān)鍵因子,我們通過在蛹期腸道干細(xì)胞譜系中過表達(dá)或敲除mira,來研究干細(xì)胞數(shù)目調(diào)控的分子機(jī)制。方法:（1）利用esg^ts在蛹期腸道干細(xì)胞中過表達(dá)Mira后統(tǒng)計(jì)腸道中干細(xì)胞及內(nèi)分泌細(xì)胞數(shù)目;（2）通過Mira-GFP、Pros以及細(xì)胞極性蛋白Bazooka（Baz）的染色揭示過表達(dá)Mira表型的內(nèi)在分子機(jī)制;（3）利用esg^ts在蛹期腸道干細(xì)胞中敲除mira后統(tǒng)計(jì)腸道中干細(xì)胞及內(nèi)分泌細(xì)胞數(shù)目;（4）利用MARCM克隆技術(shù)對(duì)過表達(dá)和敲除mira時(shí)干細(xì)胞譜系進(jìn)行追蹤;（5... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

果蠅蛹期腸道干細(xì)胞的分裂模式

華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文EWT MARCM UAS-Mira MARCM96hAPFF 96hAPFesgts>GFP esgts>UAS-MiraA BC D0.00.51.01.52.02.5****n.see36h APF60h APFTime transfer to 30℃GFP Pros GFP Prosesgts>GFPesgts>UAS-Miraesgts>GFP esgts>UAS-MiraISC/eeratioNumberofcelsISC0100020003000

在對(duì)照組 esg-Gal4 中，ISC 不對(duì)稱分裂時(shí)，Pros 分布于底部的細(xì)胞膜，Baz 定位于頂部的細(xì)胞膜（圖 3F 和 F’），EMC 對(duì)稱分裂時(shí)，Pros 均勻分布于細(xì)胞質(zhì)中，Baz也定位于頂部的細(xì)胞膜（圖3G和G’）。而在實(shí)驗(yàn)組esg>UAS-MiraGFP中，2nd 不對(duì)稱分裂時(shí)，MiraGFP 和 Pros 都分布于底部的細(xì)胞膜上，Baz 定位于頂部的細(xì)胞膜（圖 3H 和 H’），但 3rd 對(duì)稱分裂時(shí)，MiraGFP 和 Pros 都均勻分布于細(xì)胞質(zhì)中，Baz 定位到整個(gè)細(xì)胞膜上（圖 3I 和 I’）。這一結(jié)果表明，由于 Baz定位錯(cuò)誤


本文編號(hào)：3321325