背景:褪黑素主要是由松果體分泌的一種神經(jīng)內分泌激素,能夠促進許旺細胞增殖并促進周圍神經(jīng)損傷后再生。目的:探究褪黑素對許旺細胞遷移活性的影響及其相關分子機制。方法:體外培養(yǎng)大鼠許旺細胞RSC96細胞株并鑒定;CCK-8檢測褪黑素對許旺細胞增殖活性的影響;采用Transwell細胞遷移小室,觀察0,100 nmol/L,1μmol/L,10μmol/L褪黑素作用20 h對許旺細胞遷移活性的影響;采用qRT-PCR和Western-blot檢測褪黑素受體1,2在許旺細胞上的表達情況;通過Transwell細胞遷移實驗,觀察褪黑素受體拮抗劑luzindole或典型Wnt/β-catenin信號通路抑制劑IWR-1對褪黑素促進許旺細胞遷移活性的影響。Western-blot檢測褪黑素對許旺細胞中Wnt/β-catenin信號通路活性的調控作用。結果與結論:①貼壁培養(yǎng)的RSC96細胞具有許旺細胞的典型形態(tài),細胞呈紡錘狀或三角形,細胞兩極伸出細長的突起;許旺細胞標志物S-100免疫熒光染色陽性;②相較于空白對照組,1,10μmol/L褪黑素能夠顯著促進許旺細胞遷移,對其產生化學性吸引作用,其中1μm... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2020,24(31)北大核心

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Western-blot檢測褪黑素對Wnt/β-catenin信號通路的激活情況

圖5 Western-blot檢測褪黑素對Wnt/β-catenin信號通路的激活情況MT在實驗條件下不介導褪黑素促進許旺細胞遷移的作用。實驗發(fā)現(xiàn)，許旺細胞主要表達MT1，這和CHANG等[18]的研究相一致，并且褪黑素顯著上調許旺細胞表達的MT1。盡管褪黑素大部分生物學功能由其受體MT1和MT2所介導，并且MT1或MT2可介導褪黑素對小腦顆粒細胞、間充質干細胞以及癌細胞的遷移或侵襲活性的調控[27-29]，然而，實驗發(fā)現(xiàn)MT拮抗劑luzindole作用下，褪黑素促進許旺細胞遷移的數(shù)目沒有顯著改變，因此，上調的MT表達水平可能介導褪黑素對許旺細胞其他生理活性的調控。

用Transwell小室檢測褪黑素對許旺細胞遷移活性影響

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Effect and Mechanism of Ganoderma lucidum Polysaccharides on Human Fibroblasts and Skin Wound Healing in Mice[J]. HU Feng,YAN Yu,WANG Chu-wang,LIU Yu,WANG Jing-jing,ZHOU Fang,ZENG Qing-hai,ZHOU Xiao,CHEN Jia,WANG Ai-jun,ZHOU Jian-da.  Chinese Journal of Integrative Medicine. 2019(03)
[2]Comparative study of microarray and experimental data on Schwann cells in peripheral nerve degeneration and regeneration: big data analysis[J]. Ulfuara Shefa,Junyang Jung.  Neural Regeneration Research. 2019(06)
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本文編號：3303260