目的探討過表達原鈣黏蛋白7（Pcdh7）基因?qū)π∈笤由窠?jīng)元突起發(fā)育的影響。方法體外原代培養(yǎng)C57/B6小鼠胚胎18.5 d的大腦皮層神經(jīng)元,隨機分為空白對照組、實驗對照組（空載組）和過表達原鈣黏蛋白7基因組（過表達組）。運用免疫細胞化學術檢測神經(jīng)元突起的標記物β-Tubulin Ⅲ的表達來反映各組培養(yǎng)的神經(jīng)元軸突的長度和初級樹突分支數(shù),同時,采用Western blot檢測各組神經(jīng)元Pcdh7及磷酸化絲切蛋白的表達水平。結(jié)果過表達Pcdh7基因后,其皮層神經(jīng)元軸突長度[（247.4±99.38）μm]顯著高于對照組和實驗對照組[分別為（179.4±97.91）μm和（172.1±65.20）μm],差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）,但其初級樹突分支數(shù)（2.74±1.302）卻明顯低于對照組和空載組（分別為3.726±0.890和3.793±1.196）（P<0.01）;而Western blot結(jié)果顯示,當原代培養(yǎng)的神經(jīng)元過表達Pcdh7基因時,與對照組相比,其磷酸化絲切蛋白的表達水平明顯降低（P<0.01）。結(jié)論在原代培養(yǎng)的小鼠皮層神經(jīng)元中過表達Pcdh7基因... 

【文章來源】：解剖學研究. 2020,42(03)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

3 組小鼠皮層神經(jīng)元Pcdh7蛋白水平比較*與空白對照組相比，P<0.01；#與空載組相比，P<0.01

原代培養(yǎng)皮層神經(jīng)元經(jīng)相應病毒處理3 d后，免疫熒光標記體外培養(yǎng)的原代皮層神經(jīng)元（E18.5 d的胎鼠）（圖2）。過表達組的神經(jīng)元軸突長度顯著高于對照組和空載組（P<0.01），空載組與對照組之間的軸突長度無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。過表達組的神經(jīng)元初級樹突分支數(shù)顯著低于對照組和空載組（P<0.01），且空載組與對照組之間差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）（表1）。2.3 各組原代皮層神經(jīng)元p-Cofilin蛋白水平比較

神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育依靠細胞-細胞間相互作用進行調(diào)節(jié)，這種相互作用主要是由細胞粘附分子——鈣黏蛋白介導的。原鈣黏蛋白（Pcdhs）作為鈣黏蛋白超家族中最大的亞家族，主要在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中表達，可分為簇狀原鈣黏蛋白和非簇狀原鈣黏蛋白[10]。Pcdh7作為非簇狀原鈣黏蛋白中δ1-Pcdhs家族的一員，對神經(jīng)的發(fā)育過程具有重要作用，包括軸突引導[11]和突觸發(fā)生[12]。既往研究顯示，Pcdh7基因的異常表達與多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病密切相關[8-9,13]，但其在神經(jīng)發(fā)育過程中所發(fā)揮的作用仍需進一步研究。本課題組前期研究結(jié)果表明，Pcdh7在小鼠大腦的發(fā)育過程中呈現(xiàn)時間空間特異性表達模式[14]。自胚胎期12.5 d開始，Pcdh7在小鼠大腦皮層中的相對表達量逐漸升高，至胚胎期18.5 d到達峰值，推測其可能在小鼠大腦皮層的發(fā)育過程中發(fā)揮作用。在皮層神經(jīng)元中過表達Pcdh7導致神經(jīng)元凋亡率明顯升高，而在此基礎上干擾Pcdh7的表達可適當降低神經(jīng)元的凋亡率[5]。已有文獻報道，在軸突引導因子Sema3a存在的情況下，Pcdh7在非洲蟾蜍中的異構(gòu)體NF-Protocadherin表達水平明顯上升，可顯著升高其視網(wǎng)膜神經(jīng)元生長錐發(fā)生崩塌的概率[15]。同樣，本研究結(jié)果顯示，與對照組相比，在小鼠皮層神經(jīng)元中過表達Pcdh7能夠顯著促進軸突過度生長，同時抑制初級樹突分支的產(chǎn)生，提示在小鼠皮層神經(jīng)元中過表達Pcdh7基因會影響其軸突的正常發(fā)育。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]ICR小鼠腦發(fā)育過程中原鈣黏蛋白7a表達及意義[J]. 肖華娟,亓月,李佳娜,熊軼.  中華實用診斷與治療雜志. 2017(11)



本文編號：3259780