背景和目的血管平滑肌細胞（VSMCs）異常增殖是高血壓、動脈粥樣硬化等血管重構性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理學基礎。研究清楚誘導VSMCs異常增殖的因素和機制,對防治該類疾病有著重要的理論意義和科學價值。自噬是真核生物在應激狀態(tài)下維持細胞內穩(wěn)態(tài)的一種自我保護機制。自噬參與了多種細胞因子、血管活性物質、剪切應力、nc RNA等誘導的VSMCs增殖,一些調節(jié)哺乳動物細胞自噬的信號通路（如PI3K/AKT/m TOR）同時也是調節(jié)細胞增殖的重要信號通路。血管緊張素Ⅱ作為誘導VSMCs SS異常增殖的主要生物活性因子之一,通過氧化應激和JAK2-STAT3、p38MAPK、PI3K/AKt等多條信號轉導通路促進VSMCs增殖。最新研究發(fā)現,AngⅡ可通過氧化應激和Rho A/Rho Kinase（ROCK）信號途徑誘導VSMCs自噬。mi R-17-5p通過負向靶向調節(jié)STAT3,誘導低氧條件下的自噬發(fā)揮抗VSMCs SS凋亡作用。因此,本課題擬以人主動脈平滑肌細胞為研究對象,應用分子生物學方法探討AngⅡ誘導STAT3信號通路對自噬的調節(jié)以及自噬對VSMCs增殖的影響,為闡明血管重構性疾病的病理生... 

【文章來源】：南華大學湖南省

【文章頁數】：50 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

研究假說圖

圖 4.1 AngⅡ處理濃度和時間對 LC3B -Ⅱ、Beclin1 和 p62 蛋白表達的影響不同濃度 AngⅡ處理 VSMCs 24 小時和 10-7mol/LAngⅡ處理 VSMCs 不同時間，Western blot法檢測 Beclin1（A）、LC3B-Ⅱ（B）、p62 的表達量（C）。*P<0.05 vs 0 mol/L；**P <0.01vs 0mol/L；**P <0.01 vs 0 mol/L；***P <0.001vs 0 mol/L；# #P <0.01vs 10-7mol/L，n=3。4.2 AngⅡ促進 VSMCsS 自噬流的產生取對數生長期 VSMCs，用 50μM chloroquine 預處理 30min，再用 10-7mol/LAngⅡ孵育 24h 后，Western blot 法檢測 LC3B-II 表達水平。結果顯示，chloroquine的預處理使 VSMCs 基礎的 LC3B-II 水平升高，具有統(tǒng)計學意義（P＜ 0.05）（圖11

圖 4.2 氯喹預處理對 LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ轉化率的影響用 50μM chloroquine 預處理 30min，再用 10-7mol/LAngⅡ孵育 VSMCs 24h，Western blot 法檢測 LC3-Ⅱ表達量。**P <0.01 vs control group；#P <0.05 vs AngⅡ group，n=3。4.3AngⅡ誘導的自噬促進 VSMCs 增殖4.3.1AngⅡ促進 VSMCs 增殖取對數生長期 VSMCs，用不同濃度 AngⅡ（10-10mol/L、10-9mol/L、10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L）孵育 VSMCs 24 小時以及用 10-7mol/LAngⅡ孵育 VSMCs不同時間（0h、6h、12h、24h、36h），Western blot 法檢測增殖細胞核抗原（PCNA）表達水平。結果顯示，在 10-10～10-7mol/L 的濃度范圍內，PCNA 表達量呈 AngⅡ濃度依賴性地上調，從 10-10mol/L 濃度開始上升明顯，具有統(tǒng)計學意義（P＜ 0.05）（圖 4.3 A）。與 10-7mol/L 相比，10-6mol/LAngⅡ使 PCNA 表達減少；在 0-24h的時間范圍內 PCNA 表達量呈時間依賴性地增加，從 6h 開始上升顯著，具有統(tǒng)

【參考文獻】：
期刊論文
[1]電針“百會”“太沖”對自發(fā)性高血壓大鼠心肌肥大和自噬的影響[J]. 張躍,紀智,袁靜云,王紫娟,梁靖蓉,吳嬌娟,臧穎穎,王朝陽,劉清國.  針刺研究. 2019(02)
[2]大黃素通過自噬抑制血管平滑肌細胞的增殖和遷移[J]. 權彥,李小蓉,趙忠孝,劉靖麗,張朋.  西北藥學雜志. 2018(01)
[3]糖尿病發(fā)病的表觀遺傳學機制[J]. 洪陳亮,秦旭平.  中南醫(yī)學科學雜志. 2017(01)
[4]選擇性自噬接頭蛋白p62/sequestosome 1的研究進展[J]. 陳易斯,宋福永.  中國藥理學與毒理學雜志. 2016(03)
[5]STAT3與腫瘤自噬[J]. 周唯,許言午,潘一濱.  生命的化學. 2016(01)
[6]自噬干預對低剪切應力下血管內皮細胞eNOS和ET-1表達的影響[J]. 李小紅,郭鳳霞,楊沁,李榮慶,趙戰(zhàn)芝,危當恒.  中國動脈硬化雜志. 2014(09)
[7]自噬在心血管疾病中的作用研究進展[J]. 林超,劉兆國,錢星,徐斌,包東橋,李育,卞慧敏.  中國藥理學通報. 2014(10)
[8]STAT3信號轉導通路抑制劑誘導膠質瘤干細胞產生自噬的研究[J]. 賽克,WK Alfred Yung,Howard Colman,Waldemar Priebe,陳忠平.  中國神經腫瘤雜志. 2011(02)
[9]自噬的調控通路和腫瘤[J]. 張秀春,李丹妮,李豐.  生命科學. 2011(01)
[10]血管重構及其藥物治療[J]. 曾泗宇,秦旭平.  現代生物醫(yī)學進展. 2007(05)



本文編號：3122323