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環(huán)狀RNA(circAMBRA1和circANKRD17)對Hela和OCM-1細胞增殖和轉(zhuǎn)移的影響及其機制分析

發(fā)布時間:2021-04-01 03:58
  背景:作為非編碼RNA(non-coding RNA,ncRNA)中的特殊成員,circRNA是一類天然存在的內(nèi)源性環(huán)狀RNA。CircRNA具有多種生物學功能,而作為ceRNA以競爭性結(jié)合microRNA的方式來參與轉(zhuǎn)錄后調(diào)控是其重要功能之一,它與多種疾病的發(fā)生和發(fā)展有關(guān),包括神經(jīng)和心血管系統(tǒng)疾病。目前較多的研究已經(jīng)顯示在不同的腫瘤中circRNA存在特異性表達,目前,有關(guān)circRNA的生物學功能的認識仍很膚淺,尚有大量的實驗需要推進,對于circRNA的深入研究有望為臨床應用中新型生物標志物或治療靶標的發(fā)現(xiàn)提供理論依據(jù)。我們通過相關(guān)軟件預測與PTEN有關(guān)的circRNA,發(fā)現(xiàn)circAMBRA1和circANKRD17可以與PTEN競爭性結(jié)合microRNA,然而circAMBRA1和circANKRD17至今尚未有報道。這兩個circRNA分別來源于親本基因AMBRA1和ANKRD17,主要形成于mRNA的剪接加工過程。AMBRA1是調(diào)控細胞凋亡和自噬的重要信號分子,對于體內(nèi)衰老、損傷和壞死細胞的及時處理清除至關(guān)重要。同時維持機體的相對穩(wěn)態(tài),對免疫系統(tǒng)起著輔助性作用。有研究表明... 

【文章來源】:河南大學河南省

【文章頁數(shù)】:91 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

環(huán)狀RNA(circAMBRA1和circANKRD17)對Hela和OCM-1細胞增殖和轉(zhuǎn)移的影響及其機制分析


3.1pGEM-T-easyvector載體質(zhì)粒圖譜

序列,位點,序列,首尾


圖 2.1.3.2 circAMBRA1 和 circANKRD17 Junction site 測序結(jié)果峰圖 (a)circAMBRA1 序列峰圖比對結(jié)果:Junction site 表示 circAMBRA1 5’端與 3’端首尾相連的接頭位點;(b)circANKRD17 序列峰圖比對結(jié)果:Junction site 表示 circANKRD17 5’端與 3’端首尾相接的接頭位點;2.1.4 不同細胞中 circAMBRA1 和 circANKRD17 表達水平檢測

內(nèi)源性,表達水平,處理組,檢測結(jié)果


圖 2.1.5 RT-qPCR 檢測內(nèi)源性 circAMBRA1 和 circAKRD17 在 RNase R 處理前后相對表達水平結(jié)果圖(a)Hela 細胞中,RNase R 處理前后 circAMBRA1 及 AMBRA1 相對水平檢測結(jié)果圖:Hela-Mock 代表未處理組,Hela-RNase R 代表使用 RNase R 處理組,P<0.05,有統(tǒng)計學意義;(b)OCM-1 細胞中,RNase R 處理前后 circANKRD17 及 ANKRD17 相對水平檢測結(jié)果圖:OCM-1-Mock 代表未處理組,OCM-1-RNase代表使用 RNase R 處理組;2.2 PHB-circAMBRA1 和 PCD-circANKRD17 過表達重組質(zhì)粒構(gòu)


本文編號:3112648

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