目的對金黃色葡萄球菌（簡稱金葡菌）一種新型金屬磷酸酶（metallophosphatase,MPP）SA1662進行遺傳特征分析及生物學功能鑒定。方法從金葡菌基因組DNA中克隆SA1662基因,通過序列比對和構建進化樹分析其遺傳特征;構建重組表達質粒,轉化大腸埃希菌BL21,IPTG誘導表達,表達的重組蛋白經Ni柱純化后,測定酶活性。應用同源重組技術構建SA1662基因缺失株,分析SA1662基因缺失對金葡菌生長、萬古霉素敏感性、細菌自溶性和細菌生物菌膜形成的影響,探討SA1662的生物學功能。結果 SA1662蛋白具有MPP類蛋白結構域,并含有特征性金屬離子結合位點,與金葡菌和施維茨葡萄球菌中相關蛋白有更近的親緣關系。該蛋白酶活性依賴于Mg²⁺和Mn²⁺,特別是Mg²⁺。與野生型菌株相比,SA1662基因缺失后,細菌生長速度減慢,萬古霉素敏感性、TritonX-100誘導下的細菌自溶性和細菌生物菌膜形成能力均下降。結論 SA1662蛋白為一種新型的金葡菌MPP,在細菌抗逆性中起著重要作用。 

【文章來源】：中國生物制品學雜志. 2020,33(02)

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

金葡菌SA1662和不同細菌已知金屬磷酸酶的比對

SA1662基因缺失株對萬古霉素的敏感性

0 SA1662基因缺失株的自溶性

【參考文獻】：
期刊論文
[1]金黃色葡萄球菌重要毒力因子的功能及其抑制劑研究進展[J]. 陳菲菲,狄紅霞,藍樂夫.  科學通報. 2013(36)



本文編號：3077942