<正>原位雜交和免疫組化雙染技術是在不同層次來檢測同一細胞上某些物質的表達是否有相關性的一種實驗方法。由于操作步驟復雜,實驗不易取得理想效果。我科結合本實驗室實際情況,經過反復摸索,獲得滿意效果,現(xiàn)將我科經驗總結如下。1材料與方法1.1標本來源收集廣東省人民醫(yī)院病理科2019年1～5月EBER陽性病例16例,其中NK/T淋巴瘤8例,Burkitt淋巴瘤2例,血管免疫母細胞性淋巴瘤4例,漿母細胞性淋巴瘤1例,淋巴結外周T細胞淋巴瘤1例。所有標本均及時固定及規(guī)范化取材,經10%中性福爾馬林固定。 

【文章來源】：臨床與實驗病理學雜志. 2020,36(09)北大核心

【文章頁數(shù)】：2 頁

【部分圖文】：

EBER與CD3雙染，原位雜交和免疫組化雙染

圖1 EBER與CD3雙染，原位雜交和免疫組化雙染酶消化是原位雜交檢測成功與否的關鍵步驟。其目的是去除靶核酸周圍的蛋白質,增加組織的通透性,暴露靶基因,有利于探針滲透,增強雜交信號強度[5]。在單純性的EBER原位雜交檢測中,試劑盒推薦的酶消化時間為30 min,但作者發(fā)現(xiàn),在EBER原位雜交和免疫組化雙染實驗中,如果先消化30 min后免疫組化再稍加修復,免疫組化染色大部分沒信號或信號極弱,細胞結構往往不完整,呈修復過度狀態(tài);如果免疫組化不修復,細胞結構比較完好,但免疫組化染色太弱或沒信號,達不到染色要求。經過反復摸索,作者首先就不同的酶消化時間對EBER原位雜交結果的影響進行比較,發(fā)現(xiàn)酶消化12、16、20 min,EBER原位雜交染色信號均夠強,背景干凈,達到染色要求。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]EBV感染相關性疾病的研究現(xiàn)狀[J]. 陳秋雨,韓艷秋.  中華醫(yī)院感染學雜志. 2019(07)
[2]皮膚T/NK細胞EB病毒感染淋巴組織增殖性疾病及NK/T細胞淋巴瘤[J]. 張燕林,韋萍,謝建蘭,鄭媛媛,周小鴿.  臨床與實驗病理學雜志. 2018(10)
[3]EB病毒感染實驗室診斷及臨床應用專家共識[J]. 謝正德,劉春艷,艾軍紅.  中華實驗和臨床病毒學雜志. 2018 (01)
[4]原位雜交與免疫組化雙染法在淋巴瘤診斷中的應用[J]. 滕孝靜,王衛(wèi)東,謝建蘭,周小鴿.  臨床和實驗醫(yī)學雜志. 2013(14)



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