目的探討補腎化痰祛瘀方對銅負荷小鼠卵泡發(fā)育障礙的影響及其作用機制。方法將雌性C57小鼠隨機分為6組,即正常組、銅負荷模型組、二巰丁二酸組、肝豆靈組、補腎化痰祛瘀方組、補腎化痰祛瘀方+二巰丁二酸組,每組20只。采用高銅復制銅負荷小鼠模型,即以100 mg/kg硫酸銅（CuSO₄·5H₂O）每天上午同一時間灌胃1次,正常組用等量的生理鹽水灌胃,共28 d。在給銅的第15天開始除正常組和模型組灌胃生理鹽水外,其他4組每日分別灌胃給藥,二巰丁二酸組0.16 g/kg、肝豆靈組1.2 g/kg、補腎化痰祛瘀方組1.5 g/kg、補腎化痰祛瘀方+二巰丁二酸組,共14 d至給銅的第28天結束。運用促性腺激素促排方法檢測小鼠排卵數(shù),蘇木精-伊紅染色觀察各級卵泡發(fā)育情況,電鏡觀察小鼠卵丘復合物超微結構,采用免疫熒光染色法檢測卵丘復合物顆粒細胞Ki67的表達水平以觀察細胞增殖情況。結果與正常組比較,各組小鼠排卵數(shù)、正常次級卵泡和竇卵泡數(shù)、正常線粒體數(shù)目和顆粒細胞Ki67表達水平顯著減少（P<0.05）;異常線粒體數(shù)目顯著增加（P<0.05）;補腎化痰... 

【文章來源】：北京中醫(yī)藥大學學報. 2020,43(03)北大核心

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【部分圖文】：

各組小鼠卵巢病理改變結果 (HE染色 ×100)

各組相比于正常組小鼠卵丘復合物內(nèi)正常線粒體數(shù)目明顯減少(P<0.01),異常變性的線粒體數(shù)目明顯增加(P<0.01);與銅負荷模型組比較,二巰丁二酸組、肝豆靈組、補腎化痰祛瘀方組、補腎化痰祛瘀方+二巰丁二酸組的正常線粒體數(shù)目明顯增加、異常變性線粒體數(shù)目明顯減少(P<0.05);與二巰丁二酸組比較,肝豆靈組、補腎化痰祛瘀方組在增加正常線粒體數(shù)目、減少異常變性線粒體數(shù)目方面下降(P<0.05),但補腎化痰祛瘀方+二巰丁二酸組可顯著增加正常線粒體數(shù)目、減少異常變性線粒體數(shù)目(P<0.05);與肝豆靈組比較,補腎化痰祛瘀方組和補腎化痰祛瘀方+二巰丁二酸組正常線粒體數(shù)目增加(P<0.05);與補腎化痰祛瘀方比較,補腎化痰祛瘀方+二巰丁二酸組正常線粒體數(shù)目顯著增加、異常變性線粒體數(shù)目減少(P<0.01)。見圖2、表3。表3 各組小鼠卵丘復合物內(nèi)線粒體數(shù)目比較 (104/mm2; x ˉ ±s ;n=12)Table 3 Number of mitochondria in cumulus complex of mice in different groups (104/mm2; x ˉ ±s ;n=12) 組別Groups 劑量Dose (g/kg) 正常線粒體數(shù)目Number of normol mitochondria 異常線粒體數(shù)目Number of abnormol mitochondria 正常組Normal group 9.16±0.84 1.50±0.07 銅負荷模型組Copper-loaded model group 3.75±0.62## 2.99±0.09## 二巰丁二酸組DMSA group 0.16 5.80±0.73##▲▲ 2.104±0.10##▲ 肝豆靈組GDL group 1.20 4.13±1.29##▲** 2.39±0.08##▲* 補腎化痰祛瘀方組BSHTQYF group 1.50 5.16±0.68##▲▲*&& 2.36±0.06##▲* 補腎化痰祛瘀方+二巰丁二酸組BSHTQYF+DMSA group 1.50+0.16 6.72±0.59##▲▲**&&ΔΔ 1.75±0.07#▲▲*&&ΔΔ F 68.296 523.562 P <0.000 1 <0.000 1 注:與正常組比較#P<0.05 ##P<0.01;與銅負荷模型組比較▲P<0.05 ▲▲P<0.01;與二巰丁二酸組比較*P<0.05 **P<0.01;與肝豆靈組比較&P <0.05 &&P <0.01;與補腎化痰祛瘀方組比較ΔP<0.05 ΔΔP<0.01。Note: #P<0.05 ##P<0.01, compared with normal group; ▲P<0.05 ▲▲P<0.01, compared with copper-loaded model group; *P<0.05 **P<0.01, compared with DMSA group; &P<0.05 &&P<0.01, compared with GDL group; ΔP<0.05 ΔΔP<0.01, compared with BSHTQYF group.

表4 各組小鼠卵丘復合物顆粒細胞Ki67的表達率 (%; x ˉ ±s ;n=12)Table 4 Granulosa cell Ki67 expression of cumulus complex of mice in different groups (%; x ˉ ±s ;n=12) 組別 Groups 劑量Dose(g/kg) 陽性表達率Positive expression rate 正常組 Normal group 93.75±2.80 銅負荷模型組 Copper-loaded model group 35.00±3.06## 二巰丁二酸組 DMSA group 0.16 74.58±3.36##▲▲ 肝豆靈組 GDL group 1.20 54.83±4.19##▲▲** 補腎化痰祛瘀方組 BSHTQYF group 1.50 65.00±3.17##▲▲*& 補腎化痰祛瘀方+二巰丁二酸 BSHTQYF+DMSA group 1.50+0.16 85.00±3.17##▲▲**&&ΔΔ F 493.179 P <0.000 1 注:與正常組比較#P<0.05 ##P<0.01;與銅負荷模型組比較▲P<0.05 ▲▲P<0.01;與二巰丁二酸組比較*P<0.05 **P<0.01;與肝豆靈組比較&P <0.05 &&P <0.01;與補腎化痰祛瘀方組比較ΔP<0.05 ΔΔP<0.01。Note: #P<0.05 ##P<0.01, compared with normal group; ▲P<0.05 ▲▲P<0.01, compared with copper-loaded model group; *P<0.05 **P<0.01, compared with DMSA group; &P<0.05 &&P<0.01, compared with GDL group; ΔP<0.05 ΔΔP<0.01, compared with BSHTQYF group.3 討論

【參考文獻】：
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