本文關(guān)鍵詞：Jnk2通過調(diào)節(jié)壓力誘導(dǎo)的線粒體自噬抑制NLRP3炎癥小體的激活，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：NLRP3炎癥小體是一種多蛋白復(fù)合物,在臨床上涉及到多種疾病,例如肥胖癥,痛風(fēng),阿爾茨海默型老年癡呆和一些自發(fā)性炎癥等。研究報(bào)道病理或損傷相關(guān)分子模型可以引發(fā)炎癥小體的激活。一旦被激活,NLRP3炎癥小體會(huì)馬上活化半胱氨酸蛋白酶Caspase-1,活化的Caspase-1隨即開始剪切促炎癥因子IL18和IL-1??的前體形式使其成熟并開始分泌參與相應(yīng)的炎癥反應(yīng)。NLRP3炎癥小體的激活本身是一種免疫監(jiān)管行為,可以修復(fù)組織損傷,但是需要注意的是它的失調(diào)會(huì)引發(fā)嚴(yán)重的免疫疾病。因此在臨床治療上我們需要平衡炎癥小體在自主防御,組織修復(fù)和超活化所引起的炎癥疾病的關(guān)系。目前臨床上的主要治療手段是通過阻斷IL-1??的活化來達(dá)到治療目的。大量研究表明NLRP3炎癥小體的激活最主要的三個(gè)因素是鉀離子流,溶酶體蛋白酶泄漏和活性氧ROS的積累。而活性氧ROS最主要的來源來自線粒體,最近越來越多的文章證明了線粒體與NLRP3炎癥小體活化之間的關(guān)系。線粒體自噬可以通過清除積累的損傷線粒體和過多的活性氧ROS來減緩炎癥小體的活化。在這篇文章中,我們發(fā)現(xiàn)小鼠胚胎成纖維Jnk2基因缺陷型細(xì)胞存在過多的細(xì)胞自噬活性,這種活性消耗了過多的線粒體自噬轉(zhuǎn)換蛋白p62。p62是裝配線粒體自噬的必要蛋白。當(dāng)Jnk2基因缺陷型細(xì)胞遭遇細(xì)胞壓力或外界刺激時(shí),過少的p62會(huì)導(dǎo)致其無法通過誘導(dǎo)線粒體自噬來清理損傷的線粒體,從而積累過多的損傷線粒體以及線粒體損傷積累產(chǎn)生的ROS,引發(fā)炎癥小體的激活。在內(nèi)毒素LPS誘導(dǎo)的敗血病休克小鼠模型中,腹腔注射LPS會(huì)導(dǎo)致Jnk2基因缺陷型小鼠誘發(fā)過多的NLRP3炎癥小體活性,分泌大量促炎癥因子IL18和IL-1?從而導(dǎo)致其存活時(shí)間顯著縮短�？偟膩碚f,我們的研究闡述了Jnk2可以通過對線粒體的質(zhì)量控制來抑制炎癥小體超活化的調(diào)控機(jī)制。在臨床上,該調(diào)控機(jī)制可以為減輕NLRP3炎癥小體活化引起的自身性炎癥疾病提供潛在的藥物靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：Jnk2 線粒體自噬 p62 NLRP3炎癥小體
【學(xué)位授予單位】：浙江理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R364.5
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 1、研究背景8-15
• 1.1 NLRP3炎癥小體8-9
• 1.2 線粒體自噬9-10
• 1.3 轉(zhuǎn)換蛋白p6210-12
• 1.4 c-Jun蛋白氮末端激酶Jnk12-14
• 1.5 研究目的與意義14-15
• 2、實(shí)驗(yàn)材料與方法15-28
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料15-16
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑15-16
• 2.1.2 小鼠16
• 2.1.3 si RNA序列16
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法16-28
• 2.2.1 Western blot16-18
• 2.2.2 免疫熒光18-19
• 2.2.3 Multiplex immunoassay19-21
• 2.2.4 RNA抽提21-22
• 2.2.5 質(zhì)粒和si RNA的轉(zhuǎn)染22-23
• 2.2.6 細(xì)胞培液上清沉淀23
• 2.2.7 RT-QPCR23-24
• 2.2.8 Lentivirus感染24
• 2.2.9 In vivo實(shí)驗(yàn)24
• 2.2.10 細(xì)胞因子分析24
• 2.2.11 分離和培養(yǎng)小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞(BMDMs)24-26
• 2.2.12 炎癥小體活性分析26
• 2.2.13 線粒體ROS水平測量26
• 2.2.14 透射電子顯微鏡26
• 2.2.15 穩(wěn)定細(xì)胞系的建立26-27
• 2.2.16 熒光顯微鏡27-28
• 3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-40
• 3.1 Jnk2參與壓力誘導(dǎo)的線粒體自噬作用的調(diào)節(jié)28-30
• 3.2 Jnk2蛋白維持自噬轉(zhuǎn)換蛋白p62的穩(wěn)態(tài)表達(dá)水平30-32
• 3.3 穩(wěn)態(tài)水平下Jnk2蛋白抑制了過量的細(xì)胞自噬活性32-34
• 3.4 Jnk2抑制炎癥小體的活性34-38
• 3.5 Jnk2蛋白不影響紅細(xì)胞的成熟38-40
• 4、討論40-43
• 5、結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-49
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果49-50
• 致謝50-51

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 胡堅(jiān);楊閏平;汶春苗;李恒進(jìn);趙華;;NLRP3炎癥小體在咪喹莫特誘導(dǎo)小鼠銀屑病樣模型中的表達(dá)及芥菜籽對其的影響[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2013年09期

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5 趙U

本文編號：299670