目的比較不同腸上皮細胞株在3D培養(yǎng)條件下形成腸類器官的潛能及特點,為利用腸上皮細胞株培養(yǎng)腸類器官提供實驗研究基礎。方法使用IEC-6、CT26.WT、Caco-2三種腸上皮細胞株進行3D培養(yǎng),分析不同細胞株形成腸類器官的潛能。流式分選獲取Caco-2單細胞后使用Matrigel進行培養(yǎng)并測定其生長速度。比較2D和3D培養(yǎng)條件下Caco-2細胞中腸道干細胞標志物Lgr5、Olfm4及增殖標志物Ki67的mRNA表達差異。免疫熒光染色分析2D和3D培養(yǎng)時Caco-2細胞內(nèi)Ki67陽性細胞及l(fā)amp1陽性溶酶體的分布特點。比較5 Gy和15 Gy照射后Caco-2來源腸類器官中TUNEL陽性細胞分布特點。結(jié)果 3D培養(yǎng)時,Caco-2細胞可形成腸類器官,而IEC-6和CT26.WT細胞不能形成腸類器官,且單個Caco-2細胞也可形成腸類器官。Caco-2來源腸類器官中腸道干細胞標志物Lgr5、Olfm4和細胞增殖標志物Ki67的mRNA表達水平較2D培養(yǎng)時顯著降低（P<0.05）,Ki67陽性增殖細胞較2D培養(yǎng)顯著減少。Caco-2來源腸類器官中細胞內(nèi)溶酶體呈極性分布,與小腸組織切片中... 

【文章來源】：第三軍醫(yī)大學學報. 2020,42(01)北大核心

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

2D培養(yǎng)和3D培養(yǎng)10 d時3種腸上皮細胞株的形態(tài)對比

流式細胞儀分選Caco-2單細胞

3D條件下Caco-2單細胞形成腸類器官的動態(tài)變化


本文編號：2979261