目的探究旋毛蟲和偽旋毛蟲肌幼蟲時期排泄分泌產(chǎn)物（ESP）中的差異蛋白,分析兩者免疫抑制差異的原因和參與包囊形成的潛在功能蛋白。方法收集旋毛蟲和偽旋毛蟲ESP,采用二喹啉甲酸檢測法測定旋毛蟲、偽旋毛蟲ESP蛋白濃度,十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）檢測蛋白質(zhì)量,對經(jīng)過超濾管酶解法酶解后的ESP多肽段采用同位素相對定量和絕對定量標(biāo)記技術(shù)（iTRAQ）標(biāo)記,混合標(biāo)記后的樣品進行液相分離高pH反相色譜和液相串聯(lián)質(zhì)譜檢測。檢測完成后,搜索UniProt數(shù)據(jù)庫中的旋毛蟲（Trichinella spiralis）和偽旋毛蟲（Trichinella pseiudospiralis）數(shù)據(jù)庫,在可信蛋白（得分80以上）的基礎(chǔ)上篩選同源蛋白,比較同源蛋白的差異表達情況。利用QuickGO對差異蛋白進行標(biāo)準化描述。選取9個差異明顯的重要蛋白進行實時熒光定量PCR驗證,采用△△Ct法驗證基因表達水平。采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果經(jīng)iTRAQ標(biāo)記鑒定出旋毛蟲可信蛋白492個,偽旋毛蟲535個,可用于定量分析的旋毛蟲蛋白193個,偽旋毛蟲蛋白164個。旋毛蟲/偽旋毛蟲同源比對... 

【文章來源】：中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2020,38(01)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

qRT-PCR驗證旋毛蟲/偽旋毛蟲部分蛋白在基因轉(zhuǎn)錄水平的表達

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2964228