目的探討腸道病毒71型（EV71）誘導(dǎo)THP-1巨噬細(xì)胞自噬和凋亡及其相關(guān)信號(hào)通路。方法設(shè)置EV71處理組和DMEM對(duì)照組,EV71處理組是用感染復(fù)數(shù)0.1感染THP-1巨噬細(xì)胞2、8和16 h,對(duì)照組是用DMEM培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照即是0 h組。CCK-8檢測(cè)EV71對(duì)THP-1巨噬細(xì)胞增殖和毒性的影響;熒光定量PCR法檢測(cè)EV71在細(xì)胞內(nèi)病毒核酸變化情況;透射電鏡觀察THP-1巨噬細(xì)胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)變化;Hoechst 33342染色法和AnnexinV/PI雙染法檢測(cè)EV71誘導(dǎo)THP-1巨噬細(xì)胞凋亡的情況;免疫印跡法分析EV71誘導(dǎo)THP-1巨噬細(xì)胞自噬和凋亡相關(guān)蛋白水平的變化;用3-MA和Ac-DEVD-CHO抑制劑分別檢測(cè)EV71對(duì)THP-1巨噬細(xì)胞自噬和凋亡的影響。結(jié)果 EV71作用THP-1巨噬細(xì)胞2、8和16h的細(xì)胞存活率逐漸下降（P<0.05）;細(xì)胞內(nèi)病毒核酸拷貝數(shù)逐漸增多（P<0.01）;可見細(xì)胞內(nèi)自噬小體和病毒顆粒;總細(xì)胞凋亡率逐漸增加（P<0.01）;與對(duì)照組比較,EV71處理組LC3轉(zhuǎn)化量（LC3-II/LC3-I）逐漸增多,而p62蛋白逐漸減少... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020年06期 北大核心

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【部分圖文】：

RT-qPCR檢測(cè)THP-1巨噬細(xì)胞內(nèi)病毒核酸濃度

通過(guò)Western blot檢測(cè)細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白表達(dá)結(jié)果顯示，與0 h對(duì)比，EV71感染2、8和16 h時(shí)cleaved caspase3蛋白表達(dá)水平升高，caspase3和Bcl-2蛋白表達(dá)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與0 h對(duì)比，EV71感染2、8和16 h時(shí)cleaved caspase-8、Bak蛋白和Bax蛋白差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。圖3 Hoechst 33342染色觀察THP-1凋亡細(xì)胞核形態(tài)變化

圖2 透射電鏡檢測(cè)EV71病毒(KC122766)作用THP-1巨噬細(xì)胞的情況2.8 Ac-DEVD-CHO抑制EV71病毒誘導(dǎo)THP-1巨噬細(xì)胞的凋亡


本文編號(hào)：2951136