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2019新型冠狀病毒核衣殼蛋白的表達及在診斷方面的應(yīng)用

發(fā)布時間:2020-12-29 02:55
  目的對2019新型冠狀病毒(2019-novel Coronavirus,2019-nCoV)核衣殼蛋白(nucleocapsid protein,NP)進行原核表達、純化與鑒定,并應(yīng)用于2019-nCoV血清學診斷。方法合成2019-nCoV NP基因,克隆至pET28a載體中,構(gòu)建表達質(zhì)粒,并進行誘導純化。純化蛋白經(jīng)SDS-PAGE、間接ELISA、Western blot(WB)、免疫層析法進行鑒定。優(yōu)化間接ELISA反應(yīng)條件,進行血清抗體檢測。結(jié)果重組NP經(jīng)鎳柱純化后SDS-PAGE電泳顯示相對分子質(zhì)量約50×103,與預期一致;間接ELISA、WB表明其能與2019-nCoV感染患者血清特異性結(jié)合;用免疫層析法發(fā)現(xiàn)對NP檢測限為0.2 ng/ml;間接ELISA檢測32份2019-nCoV感染者血清及對照血清,發(fā)現(xiàn)二者結(jié)果可見明顯分群。結(jié)論原核表達的NP具有良好的免疫原性,可用于制備血清學診斷試劑。 

【文章來源】:中華實驗和臨床病毒學雜志. 2020年04期

【文章頁數(shù)】:4 頁

【參考文獻】:
期刊論文
[1]2019新型冠狀病毒及其感染性肺炎[J]. 嚴杰,李明遠,孫愛華,彭宜紅.  中華微生物學和免疫學雜志. 2020(01)



本文編號:2944868

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