造血干細胞（Hematopoietic stem cells,HSCs）是造血系統(tǒng)中具有自我更新和分化成所有成熟血液譜系能力的一類群細胞,它們對于維持機體的造血內(nèi)穩(wěn)態(tài)以及免疫功能尤為重要。HSCs移植已經(jīng)被認為是治療部分造血系統(tǒng)惡性腫瘤、骨髓和造血障礙以及免疫缺陷的有效療法,但是在臨床上仍存在局限,比如骨髓移植以及外周血HSCs移植的配型困難、供體不足以及免疫排斥反應等。而臍帶血HSCs移植雖然克服了這些困難,但單個臍帶中的HSCs的數(shù)量有限,不足以滿足病人的造血重建需求。HSCs的體外擴增是解決這一困難的最直接而有效辦法。但由于缺乏良好的培養(yǎng)體系,目前HSCs的體外擴增還遠遠不能達到臨床要求。目前已有研究證明主動脈-性腺-中腎（aorta–gonad–mesonephros,AGM）區(qū)以及卵黃囊動脈附近的內(nèi)皮細胞可以支持HSCs的體外擴增,而其他成體組織分離的內(nèi)皮細胞沒有這種能力。經(jīng)過不斷嘗試,我們確定無血清共培養(yǎng)體系,將卵黃囊內(nèi)皮細胞與LSK（Lin^-Sca1⁺ckit⁺）細胞共培養(yǎng)九天后,與單獨培養(yǎng)LSK細胞的對照... 

【文章來源】：上海師范大學上海市

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Notch信號通路示意圖

18圖 2-2 克隆形成實驗結(jié)果A: 10x10 倍放大被倍數(shù)下紅細胞祖細胞集落（BFU-E）、粒細胞-巨噬細胞祖細胞集落（CFU-GM）、多潛能粒細胞、紅細胞、巨噬細胞和巨核細胞祖細胞集落（CFU-GEMM）生長形態(tài)圖像;B: 第三天計數(shù)紅細胞祖細胞集落（BFU-E）量化圖；C:第七天計數(shù)粒細胞-巨噬細胞集落（CFU-GM）量化圖；D：第十四天計數(shù)多潛能粒細胞、紅細胞、巨噬細胞和巨核細胞祖細胞集落（CFU-GEMM）量化圖；E：第十四天計數(shù)克隆總數(shù)量化圖�！�*”代表 P＜0.05，“**”代表 P＜0.01，“***”代表 P＜0.001。共培養(yǎng) 9 天后，我們收集 co-cultivation 組和 control 組中三個副孔的所有細胞，細胞計數(shù) 1.5x103個種到 1 ml M3434 半固體甲基纖維素培養(yǎng)基中,每個樣品 3個平行樣。圖 2-2A 圖分別為原始紅細胞祖細胞（BFU-E），粒細胞 - 巨噬細胞祖細胞

20圖 2-3 小鼠競爭性骨髓移植實驗流式分析結(jié)果A：小鼠骨髓競爭性移植一個月后外周血嵌合率流式分析圖； B：小鼠骨髓競爭性移植第一個月后外周血嵌合率量化圖；C：小鼠骨髓競爭性移植第二個月外周血嵌合率量化圖；D：小鼠骨髓競爭性移植第三個月外周血嵌合率量化圖；E：小鼠骨髓競爭性移植后第三個月外周血譜系分化量化圖；F: 小鼠骨髓競爭性移植后第四個月外周血嵌合率量化圖；G：小鼠骨髓競爭性移植后第四個月外周血譜系分化量化圖；H: 小鼠骨髓競爭性移植后第四個月骨髓嵌合率量化圖；I：小鼠骨髓競爭性移植后第四個月骨髓譜系分化量化圖“*”代表 P＜0.05，“**”代表 P＜0.01，“***”代表 P＜0.001。


本文編號：2909021