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增齡對大鼠睪丸自噬水平和血睪屏障完整性的影響

發(fā)布時間:2020-11-17 09:15
   目的探究增齡過程中大鼠睪丸自噬水平的變化及其對血睪屏障的影響。方法 HE染色法觀察6、12、18和24月齡SD♂大鼠睪丸組織形態(tài)學的變化。Western blot法檢測各組大鼠睪丸自噬相關蛋白Beclin1、ATG5、ATG7和LC3Ⅱ,以及血睪屏障相關蛋白Occludin和β-catenin的表達水平變化。免疫熒光法檢測睪丸自噬相關蛋白Beclin1和LC3,以及血睪屏障相關蛋白β-catenin的蛋白表達及定位。結果 HE染色觀察發(fā)現(xiàn),增齡過程中大鼠睪丸組織形態(tài)結構發(fā)生明顯變化,生精小管萎縮,生精細胞層數(shù)減少,細胞間間隙增大,且發(fā)生部分脫落現(xiàn)象; Western blot結果顯示,增齡過程中大鼠睪丸自噬相關蛋白Beclin1、ATG5、ATG7和LC3Ⅱ,以及Occludin和β-catenin表達水平均逐漸下降;免疫熒光結果顯示,增齡過程中大鼠睪丸生精小管上皮細胞中Beclin1和LC3蛋白表達逐漸下調,并且血睪屏障標志蛋白β-catenin表達也逐漸下降。結論增齡過程中大鼠睪丸生精功能減退,其機制與睪丸生精上皮細胞自噬水平下降,進而破壞血睪屏障的完整性有關。
【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實驗動物
    1.2 主要材料與試劑
    1.3主要儀器
    1.4 方法
        1.4.1 動物分組與處理
        1.4.2 HE染色觀察大鼠睪丸組織形態(tài)學的變化
        1.4.3 Western blot檢測大鼠睪丸組織Beclin1、ATG5、ATG7、LC3Ⅱ、Occludin和β-catenin蛋白的表達水平
        1.4.4 免疫熒光法觀察大鼠睪丸組織Beclin1、LC3和β-catenin蛋白的表達及定位
        1.4.5 統(tǒng)計學處理
2 結果
    2.1 增齡過程中大鼠睪丸組織形態(tài)學的變化
    2.2 增齡過程中大鼠睪丸血睪屏障相關蛋白β-catenin和Occludin表達水平的變化
    2.3 增齡過程中大鼠睪丸自噬相關蛋白Beclin1、ATG5、ATG7和LC3Ⅱ表達水平的變化
    2.4 增齡過程中大鼠睪丸組織Beclin1和LC3蛋白表達及定位
3 討論

【參考文獻】

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【二級參考文獻】

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