目的:探討利用乙醛酸鹽誘導(dǎo)小鼠形成草酸鈣結(jié)晶而導(dǎo)致的小鼠腎損傷中腎小管上皮細(xì)胞的早期變化。方法:選擇乙醛酸鹽作為誘導(dǎo)劑通過(guò)腹腔給小鼠注射而在腎部形成草酸鈣結(jié)晶制作腎損傷動(dòng)物模型;然后利用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血漿尿素氮和血肌酐水平的變化,利用HE染色法對(duì)腎臟組織進(jìn)行染色觀察腎臟結(jié)構(gòu)的病理變化,鈣鹽染色法對(duì)腎臟組織染色觀察鈣鹽沉積情況,并利用茜素紅法對(duì)鈣鹽的沉積情況進(jìn)行半定量測(cè)定,采用蛋白質(zhì)印跡法觀察腎小管上皮細(xì)胞上的標(biāo)志蛋白E-鈣黏蛋白(E-cadherin)、廣譜細(xì)胞角蛋白(Pan-ck)和間質(zhì)標(biāo)志蛋白α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)的變化。結(jié)果:隨著乙醛酸鹽注射小鼠腹腔時(shí)間的延長(zhǎng),血肌酐和尿素氮均水平升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0. 05); HE染色結(jié)果顯示可見(jiàn)腎皮質(zhì)近曲小管處分布著相互連接的結(jié)晶,近曲腎小管的部分細(xì)胞疏松水腫,遠(yuǎn)曲小管發(fā)生擴(kuò)張,且腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生變形和腫脹,逐漸裸露出基底膜;與正常對(duì)照組比較,乙醛酸鹽干預(yù)組的HE病理評(píng)分值逐漸升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0. 05);鈣鹽染色結(jié)果顯示近端小管腔內(nèi)的草酸鈣結(jié)晶沉積量逐漸增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0. 05);蛋白印跡結(jié)果顯示E-cadherin及Pan-ck的蛋白表達(dá)呈逐漸減少的現(xiàn)象,而間質(zhì)α-SMA及Vimentin的蛋白表達(dá)量逐漸上升。結(jié)論:利用乙醛酸鹽對(duì)小鼠誘導(dǎo)使其腎臟形成草酸鈣結(jié)晶所致的腎損傷模型中,腎小管上皮細(xì)胞標(biāo)志蛋白表達(dá)量減少,而間質(zhì)標(biāo)志蛋白表達(dá)量增加,發(fā)生了腎間質(zhì)纖維化過(guò)程,從而為研究腎損傷的發(fā)生機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。
【部分圖文】：

乙醛酸鹽干預(yù)各組小鼠隨著干預(yù)時(shí)間的不斷增加，腎小管上皮細(xì)胞上的兩種標(biāo)志蛋白E-cadherin和Pan-ck蛋白的表達(dá)量逐漸減少，D5組與D0組相比，兩種蛋白的表達(dá)量均減少(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;間質(zhì)標(biāo)志蛋白α-SMA及Vimentin表達(dá)則逐漸增加，D1、D3、D5組與D0組相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。圖2 各組小鼠腎組織鈣鹽沉積結(jié)果HE×100

各組小鼠腎組織鈣鹽沉積結(jié)果HE×100
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