目的:采用核磁共振為基礎(chǔ)的代謝組學(xué)方法探討干寒環(huán)境及飲食對(duì)大鼠體內(nèi)代謝物的影響,尋找可能的生物標(biāo)記物及其相關(guān)代謝途徑。方法:70只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為健康對(duì)照組和停止干預(yù)第1天處理組(模型組1)、停止干預(yù)第3天處理組(模型組2)、停止干預(yù)第7天處理組(模型組3)、停止干預(yù)第14天處理組(模型組4)、停止干預(yù)第21天處理組(模型組5)。利用干寒環(huán)境及飲食作為應(yīng)激源干預(yù)大鼠3周,按隨處理時(shí)間處理,采集其血漿、尿液、肝、心、腎、脾等組織樣本,檢測(cè)核磁共振氫譜(~1H-NMR),結(jié)合多變量數(shù)據(jù)分析方法篩選與鑒定相關(guān)代謝標(biāo)志物,并分析代謝通路。結(jié)果:從各處理組即模型組兩兩比較的OPLS-DA分析得到的平面分布圖可見,兩組分布區(qū)域均完全分開,說明有代謝差異性。模型組自然恢復(fù)的這21天內(nèi)依然跟健康對(duì)照組均有差別。其中各模型組(1)血漿樣本相關(guān)的差異性代謝物總有19中,包括:異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸、β-羥丁酸、乳酸、丙氨酸、蛋氨酸、丙酮酸、谷酰胺、α-酮戊二酸、肌肝、�；撬�、α-葡萄糖、肉堿、β-葡萄糖、甘氨酸、肌酸、酪氨酸、甲酸等;(2)尿液樣本相關(guān)的差異性代謝物總有23種,包括:異亮氨酸、丙酸酯、乳酸、乙酸、乙酰胺、糖蛋白、丙酮、丙酮酸、α-酮戊二酸、檸檬酸、二甲胺、甲胍、三甲胺、肌酸、�；撬帷⒏拾彼�、肌酸酐、尿囊素、尿刊酸酯、苯丙氨酸、馬尿酸、三甲基組氨酸、甲酸等;(3)肝組織樣本相關(guān)差異性代謝物總有21種,包括:異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸、丙酸酯、乳酸、乙酸、蛋氨酸、脯氨酸、丙酮酸、α-酮戊二酸、膽堿、�；撬�、甘油三酯酰膽堿、α-葡萄糖、β-葡萄糖、甘氨酸、酪氨酸、尿刊酸酯、甲基煙堿、氨基馬尿酸、組氨酸等;(4)心組織樣本相關(guān)差異性代謝物總有22種,包括:異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、乳酸、乙酸、谷氨酸、脯氨酸、丙酮酸、肉堿、蘋果酸、肌氨酸、天冬氨酸、膽堿、牛磺酸、甘油三酯酰膽堿、α-葡萄糖、β-葡萄糖、丙三醇、肌酸、尿刊酸酯、肌苷等;(5)腎組織樣本相關(guān)差異性代謝物總有31種,包括:種即異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸、丙酸酯、乳酸、丙氨酸、乙酸、蛋氨酸、脯氨酸、丙酮、丙酮酸、α-酮戊二酸、天冬氨酸、肌肝、半胱氨酸、膽堿、牛磺酸、甘油三酯酰膽堿、α-葡萄糖、β-葡萄糖甘氨酸、丙三醇、肌酸、苯丙氨酸、α-羥基正戊二酸、蘇氨酸、氨基馬尿酸、酪氨酸、尿刊酸酯、組氨酸等;(6)脾組織相關(guān)差異性代謝物總有26種,包括:異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸、賴氨酸、乳酸、丙氨酸、乙酸、蛋氨酸、脯氨酸、蘋果酸、天冬氨酸、α-酮戊二酸、苯丙氨酸、膽堿、�；撬帷⒏视腿ヵＤ憠A、α-葡萄糖、β-葡萄糖、甘氨酸、丙三醇、酪氨酸、蘇氨酸、氨基馬尿酸、組氨酸、尿刊酸酯等。發(fā)現(xiàn)這些代謝物與多種代謝通路的變化密切相關(guān)。其中各模型組血漿、尿液、肝、心、腎、脾差異性代謝物相關(guān)性代謝通路分別為總有9種、6種、9種、9種、11種、8種。此外,組織形態(tài)學(xué)觀察到,與健康對(duì)照組相比各處理組即模型均有不同程度的組織損傷。結(jié)論:通過干寒環(huán)境及飲食對(duì)大鼠體內(nèi)代謝組學(xué)分析、血漿、尿液、肝、心、脾、腎中發(fā)現(xiàn)了一系列與模型相關(guān)的差異代謝物,涉及了苯丙氨酸,酪氨酸和色氨酸的生物合成;淀粉和蔗糖代謝;丙氨酸,天門冬氨酸和谷氨酸代謝;牛磺酸和次�；撬岽x;糖酵解或糖異生;甘氨酸,絲氨酸和蘇氨酸代謝;三羧酸循環(huán);丙酮酸代謝;組氨酸代謝;纈氨酸,亮氨酸和異亮氨酸的生物合成;半胱氨酸和蛋氨酸等代謝通路等,而且代謝組學(xué)及組織形態(tài)學(xué)分析結(jié)果均提示干預(yù)因素對(duì)大鼠體內(nèi)影響是長期性。本研究為了進(jìn)一步研究干寒環(huán)境及飲食對(duì)大鼠代謝特征提供了科學(xué)依據(jù),客觀化研究進(jìn)行了一次有效嘗試,加深環(huán)境因素對(duì)機(jī)體生理病理變化的認(rèn)識(shí)。
【學(xué)位單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R-332;R339.5
【部分圖文】：

模型組5 10 15.99注：N是樣本量圖1 各組大鼠體重隨時(shí)間變化趨勢(shì)（*P＜0.05，**P＜0.01）Fig.1 Trends of body weight change of rats of rats in each group with time（A、B、C、D、E、F分別代表健康對(duì)照組，模型組1、模型組2、模型組3、模型組4、模型組5）1.2 體溫變化分析結(jié)果單因素方差分析統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，與健康對(duì)照組比較，模型組第14、17、21天差別顯著有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），第7天各模型組當(dāng)中只有模型組3跟健康對(duì)照組差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。不考慮健康對(duì)照組，各模型組之間第7天：模型組1跟模型組3（P=0.03＜0.05），模型組2跟模型組3，4（P=0.000

15模型組大鼠體溫比健康對(duì)照組相比略顯低，說明施加因素對(duì)大鼠的影響。趨勢(shì)如圖所示（圖2）表3 肛溫平均值（℃）Table 3 Anal temperature average（℃）組別 第3天 第7天 第11天 第14天 第17天 第21天對(duì)照組 36.83±0.65 36.7±0.67 36.7±0.34 36.89±0.37 37.09±0.27 36.82±0.34模型組1 36.75±0.44 36.83±0.45 36.57±0.44 36.39±0.37**36.26±0.28**36.05±0.29**模型組2 37.08±0.56 37.17±0.61*36.54±0.38 36.49±0.27**36.31±0.44**36.1±0.24**模型組3 36.58±0.26 36.38±0.31●36.5±0.40 36.29±0.37**36.22±0.28**36.1±0.24**模型組4 36.86±0.41 36.63±0.27Δ36.66±0.28 36.46±0.25**36.32±0.34**36.09±0.32**模型組5 36.91±0.37 36.79±0.30Δ36.37±0.35 36.26±0.26**36.24±0.25**36.07±0.35**注：對(duì)照組指：健康對(duì)照組，與健康對(duì)照組比較*P＜0.05，**P＜0.01：各模型組與模型組1比較●P＜0.05，跟模型組2比較ΔP＜0.05。圖2 各組大鼠體溫隨時(shí)間變化趨勢(shì)Fig.2 Trends of body temperature change of rats in each group with time1.3 心電圖分析結(jié)果已測(cè)試獲得的心功能參數(shù)心率、P波時(shí)間、PR間期、QRS時(shí)間、QT間期的統(tǒng)計(jì)分析中得知（如圖3），與健康對(duì)照組相比，模型組1心率；模型組2心率、Q-T間期；模型組3心率、P波時(shí)限、PR間期、QR

新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文17圖3 六組SD大鼠典型心電圖A 健康對(duì)照組組；B 模型組1；C 模型組2；D 模型組4；E 模型組5；F 模型組5Fig 3 Electrocardiography of SD rats in each group.A：healthy control group；B：model group1；C：model group2；D：model group3；E：modelgroup4；F：model group5；1.4 臟器系數(shù)臟器系數(shù)是反應(yīng)臟器是否受損的重要指標(biāo)。結(jié)果顯示，與健康對(duì)照組相比，模型組1大鼠的肝，腦，腎系數(shù)差異明顯（P＜0.05），其中腎系數(shù)差異非常明顯（P＜0.01），其余心、脾系數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與模型組2相比，大鼠的腎系數(shù)差異顯著（P＜0.05），其他差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與模型組3相比，
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