【摘要】：曼氏血吸蟲病(Schistosomiasi mansoni)是一種威脅全球人類健康的寄生蟲病,而傳播曼氏血吸蟲的主要中間宿主是雙臍螺(Biomphalaria spp.),包括光滑雙臍螺(Biomphalaria glabrata)、亞歷山大雙臍螺(Biomphalaria alexandrina)和藁桿雙臍螺(Biomphalaria straminea)等多種水生螺。雙臍螺為腹足綱扁卷螺科物種,主要分布于非洲、拉丁美洲和中東地區(qū)。我國在1974年香港地區(qū)首次發(fā)現(xiàn)藁桿雙臍螺[11,目前該螺已在深圳及周邊地區(qū)蔓延擴散[2,3]。不同雙臍螺對曼氏血吸蟲感染存在不同的敏感性,已有研究表明,在寄生蟲感染雙臍螺階段,宿主可刺激誘導產(chǎn)生多種生理反應改變,如產(chǎn)卵[4-6]、攝食[7]、應激逃避[6]等。而宿主螺神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)遞質(zhì)在感染過程中也起到一定作用,通過曼氏血吸蟲感染光滑雙臍螺前后的基因芯片結果顯示,五羥色胺、多巴胺以及組胺的前體表達量存在顯著差異[8]。本研究通過對不同雙臍螺感染血吸蟲過程中神經(jīng)遞質(zhì)的定量檢測,比較不同感染性的雙臍螺在不同感染階段其神經(jīng)系統(tǒng)中五羥色胺與多巴胺的含量變化及趨勢,揭示單胺類遞質(zhì)在雙臍螺感染血吸蟲過程中的變化規(guī)律,為防制血吸蟲及中間宿主感染提供參考。方法本研究首先對野外螺種實驗室馴化,獲得不同雙臍螺子一代樣本;通過建立雙臍螺中樞神經(jīng)系統(tǒng)完整顯微解剖方法,為雙臍螺神經(jīng)系統(tǒng)相關實驗研究奠定基礎;通過建立高效液相色譜三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜方法,對雙臍螺中樞神經(jīng)系統(tǒng)中五羥色胺和多巴胺的定量檢測,比較對曼氏血吸蟲敏感性不同的雙臍螺,即亞歷山大雙臍螺(B.alexandrina)、光滑雙臍螺M-line(B.glabrata M-line)、光滑雙臍螺 BS-90(B.glabrata BS-90)、采自深圳自然水域的藁桿雙臍螺(B.straminea)以及引自江蘇省寄生蟲病防治研究所的光滑雙臍螺(WX)(B.glabrata,WX),在感染曼氏血吸蟲后的不同感染時間段雙臍螺中樞神經(jīng)系統(tǒng)中五羥色胺和多巴胺的生物胺含量的變化。其中,在感染實驗的第28d的尾蚴逸出結果顯示,光滑雙臍螺M-line為曼氏血吸蟲敏感株,而光滑雙臍螺BS-90為曼氏血吸蟲不敏感株。結果與討論1)光滑雙臍螺M-line和光滑雙臍螺(WX)五羥色胺在感染血吸蟲后第0-7d出現(xiàn)上升趨勢,而第7-14d出現(xiàn)明顯下降趨勢,且此后的五羥色胺濃度持續(xù)低于第0-7d的水平;藁桿雙臍螺感染曼氏血吸蟲后,五羥色胺濃度在第0-7d出現(xiàn)上升趨勢,在第7-28d出現(xiàn)持續(xù)下降,在第28-35d回升至較高水平;光滑雙臍螺BS-90在感染血吸蟲后,五羥色胺濃度在第0-7d出現(xiàn)上升趨勢,在第7-14d出現(xiàn)下降趨勢,在第14-28d出現(xiàn)回升,并在第28d后五羥色胺濃度再次下降;亞歷山大雙臍螺則在感染后第0-21d出現(xiàn)持續(xù)上升的趨勢,在第21-35d五羥色胺濃度水平出現(xiàn)下降趨勢。2)光滑雙臍螺M-line和光滑雙臍螺(WX)多巴胺濃度在感染血吸蟲后第0-1d出現(xiàn)上升的趨勢,在第1-14d出現(xiàn)下降趨勢,此后多巴胺的濃度水平持續(xù)上升至第21d達到較高水平后,再次出現(xiàn)下降趨勢;藁桿雙臍螺在感染血吸蟲后,多巴胺濃度在第1d和第14d出現(xiàn)兩個小高峰,在第28d基本回歸至感染前的水平,在第28-35d再次上升到最高水平;光滑雙臍螺BS-90與藁桿雙臍螺相比,其多巴胺濃度在第21-35d出現(xiàn)顯著高于感染前的水平;亞歷山大雙臍螺多巴胺水平在第0-28d與藁桿雙臍螺呈現(xiàn)相近的變化趨勢,在第28-35d繼續(xù)下降。不同雙臍螺神經(jīng)系統(tǒng)中五羥色胺和多巴胺濃度在血吸蟲感染后的不同時間表現(xiàn)出含量變化,提示雙臍螺被感染血吸蟲時,其神經(jīng)系統(tǒng)的五羥色胺和多巴胺參與對血吸蟲侵入的應激反應調(diào)控。光滑雙臍螺M-line與光滑雙臍螺BS-90在不同時間段五羥色胺和多巴胺含量的變化趨勢均存在顯著性差異,提示宿主螺體內(nèi)毛蚴至胞蚴轉(zhuǎn)化過程中重要抑制因素五徑色胺和多巴胺也參與胞蚴至尾蚴是轉(zhuǎn)化及逸出,即其含量增加可能是尾蚴發(fā)育和逸出受到抑制的原因。依據(jù)藁桿雙臍螺感染血吸蟲后兩種生物胺的變化,與光滑雙臍螺M-line與光滑雙臍螺BS-90比較,其敏感性與光滑雙臍螺BS-90一致。光滑雙臍螺(WX)情況相反,此螺感染曼氏血吸蟲28d后,有尾蚴逸出,且在此過程中五羥色胺和多巴胺的含量變化與光滑雙臍螺M-line一致,推測其為曼氏血吸蟲易感。結論結合五羥色胺和多巴胺等生物胺與雙臍螺易感性之間的關系,推測生物胺可能可以成為螺對血吸蟲易感性的生物檢測靶點。且根據(jù)各感染時間段的差異結果顯示,多巴胺可能比五羥色胺更適合作為生物檢測靶點。
【圖文】：

圖１－２精密解剖工具實物圖逡逑Ｆｉｇ邋１－２邋Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ邋ａｎａｔｏｍｉｃａｌ邋ｔｏｏｌｓ逡逑

２．５．３軟體固定逡逑將去殼后的雙臍螺軟體組織背面朝上，重新放入含有麻醉液的硅酮樹脂培養(yǎng)皿。逡逑如圖１－４所示，用鑷子夾住解剖針，，分別在雙臍螺的口球和外套膜偏下位置插入，進逡逑而將雙臍螺軟體組織固定。逡逑２４逡逑
【學位授予單位】：中國疾病預防控制中心
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R383.24

【參考文獻】

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1 黃少玉;鄧卓暉;陳佩璣;高世同;李曉恒;張儀;謝旭;朱蓉;呂山;郭云海;阮彩文;張啟明;余晴;潘世定;容壽銘;盧文成;劉夢然;曾p

本文編號：2686984