【摘要】：黑素瘤是一種最具侵襲性的、發(fā)生于皮膚的惡性癌癥,具有致死率高、治愈后易復(fù)發(fā)的特點(diǎn),在細(xì)胞生物學(xué)中,抑制細(xì)胞的增殖、分化和遷移等過(guò)程對(duì)黑素瘤的控制和治療具有重要的意義。已有研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞周期素依賴蛋白激酶5(Cyclin-dependent Kinase5,CDK5)在B16黑素瘤細(xì)胞中高表達(dá),CDK5-knockdown可導(dǎo)致細(xì)胞的凋亡和死亡,但CDK5-knockdown對(duì)黑素瘤細(xì)胞的遷移以及酪氨酸酶的活性影響未見報(bào)道。本研究通過(guò)細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法研究CDK5-knockdown對(duì)小鼠B16黑素瘤細(xì)胞遷移的影響以及酪氨酸酶活性進(jìn)行研究,通過(guò)對(duì)實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR)的數(shù)據(jù)分析和Western印跡結(jié)果的比對(duì)發(fā)現(xiàn)在小鼠B16黑素瘤細(xì)胞中CDK5的敲減可抑制Integrin-Betal,Integrin-Beta5和血小板衍生生長(zhǎng)因子-B(Platelet derived growth factor-B.PDGF-B)在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平的表達(dá);細(xì)胞劃痕試驗(yàn)表明在小鼠B16黑素瘤細(xì)胞中CDK5的敲減表達(dá)可抑制B16黑素瘤細(xì)胞的遷移;酪氨酸酶活性檢測(cè)結(jié)果表明小鼠B16黑素瘤細(xì)胞中CDK5的敲減表達(dá)對(duì)B16細(xì)胞中酪氨酸酶活性起到了抑制作用。本試驗(yàn)結(jié)果揭示敲減CDK5通過(guò)調(diào)控Integrin-Betal、Integrin-Beta5和PDGF-B的表達(dá)而對(duì)小鼠B16黑素瘤細(xì)胞的遷移起抑制作用,并對(duì)B16黑素瘤細(xì)胞中酪氨酸酶活性起調(diào)控作用。
【圖文】：

Ｂ１６轉(zhuǎn)染ＣＤＫ５－ｋｎ0Ｃｋｄｏｗｎ質(zhì)粒后，熒光定量ＰＣＲ和免疫印跡結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照逡逑組相比，ＣＤＫ５蛋白水平和ｍＲＮＡ水平的表達(dá)量明顯低于對(duì)照組表達(dá)量，即分別下降逡逑了邋４５％和６５％，且差異極顯著（圖２．２）邋（Ｐ＜０．０１）逡逑Ａ邐Ｂ逡逑�。义希桑慑澹捱姡龋龋龋龋慑义希桑桑濉鲞娨诲义希埃埃逡唬龋校蛇姡祝桑眨龋穑邋澹ǎ模耍靛澹耄睿铮悖耄洌铮鳎铄义希祝湾澹欤荆穑姡茫模耍瑰澹耄椋停鳎桑簦椋瑁睿徨濉鲥义希沐义希卞澹担卞义希荩驽暹婂义希蓿欤椋辏体义�？Ｈｒｆ邋（Ｖ｛Ｍ邐ＣＤＫ９邋ｆｃｉＨＭｉＭｌＭ＊邋？逡逑圖２．２邋ＣＤＫ５－ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ在蛋白和ｍＲＮＡ水平表達(dá)量逡逑注：Ａ：ＣＤＫ５ｍＲＮＡ表達(dá)水平逡逑注：Ｂ：ＣＤＫ５蛋白表達(dá)水平逡逑注：Ｃ：ＣＤＫ５蛋白灰度分析表達(dá)水平逡逑２．３實(shí)時(shí)q捁舛浚校茫液偷鞍妝澩锝峁義嫌耄危米橄啾齲茫模耍擔(dān)耄睿錚悖耄洌錚鰨詈螅校模牽疲碌模恚遙危簾澩锪肯陸盜隋澹玻擔(dān)�，橇x義喜鉅煜災(zāi)ǎ校跡埃埃擔(dān)╁澹誨澹桑睿簦澹紓潁椋睿攏澹簦幔旎蛟冢茫模耍擔(dān)耄睿錚悖耄洌錚鰨鈄櫚模恚遙危簾澩锪肯陸靛義希玻玻�，，Ｉｎｔｅ＜倽}椋睿攏澹簦幔靛逑陸盜隋澹矗擔(dān)�，且测犾极蠟�(zāi)ǎ校跡埃埃保＃校模牽疲�、Ｉｎｔｅ＜倽}椋睿攏澹簦幔戾義希保梗義

本文編號(hào)：2660939